分子雜交爐1臺圖片產品介紹:
分子雜交爐1臺圖片使用方法:
一、交換反應 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應液: 成分 加入的體積 自備的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交換反應緩沖液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶(10 U/μL) 1 μL 滅菌的超純水 補足到 25 μL 注:5 pmoles 的 5’末端約等于 0.17 μg 的長 100 bp 的雙鏈 DNA。
3. 37℃反應 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。 8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質時,請在第
8 步之后進行。
磷酸化反應標記:
A. 去磷酸化反應
1. 實驗前需自備的試劑:TE 飽和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)等 2. 在微量離心管中制備下列反應液: 成分 加入的體積 自備的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl,pH 8.0 15 μL 牛小腸堿性磷酸酶 (CIAP,10~20 U/μL)
2 μL 滅菌的超純水 補足到 150 μL
3. 50℃反應 30 分鐘。
4. 加入 150 μL 的 TE 飽和酚//(25:24:1),充分混勻。
5. 離心,取上層(水層)移到另一個微量離心管中。
6. 重復操作 4~5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl(zui終濃度 150 mM)。
8. 加入 375 μL(2.5 倍量)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
9. 離心回收沉淀,用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后,沉淀真空干燥。
10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。
磷酸化反應(前反應):
1. 在微量離心管中制備下列反應液:
2. 37℃反應 30 分鐘。
3. 下面的操作與交換反應的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的標記:
當摻入水平很低的時候,需要使用本步驟,即通過體積排阻色譜或過濾試 劑盒除去未反應的標記。Sephadex G-50 層析柱(需另購)對于去除未摻入 的 dNTPs 效果很好,它還能大幅減少小于 20 個堿基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的雙鏈 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加熱 5~10 分鐘以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 層析柱可以用來純化長度不小于 10 個 堿基的寡核苷酸。
牛津瓊脂添加劑*5添加于HB4171中
臘樣芽孢桿菌選擇瓊脂基礎 Bacilus Cereus Selective Agar Base 用于臘樣芽孢桿菌選擇性分離培養
Endo培養基 Endo Agar 250克 大腸菌的檢測
SOC培養基250g/瓶用于基因工程大腸桿菌的培養incubationmediaSOC培養基250g/瓶用于基因工程大腸桿菌的培養
疊氮鈉葡萄糖肉湯 250g 用于鏈球菌的增菌培養
OXAAdditive
葡萄糖酪胨瓊脂 Dextrose Casein-peptone Agar 用于食品中臘樣芽孢桿菌鑒定和計數(APHA方法)
RVS肉湯 RVS Broth 250克 食品中沙門氏菌檢驗選擇性增菌
SOB培養基250g/瓶用于大腸桿菌分子遺傳學菌株的培養incubationmediaSOB培養基250g/瓶用于大腸桿菌分子遺傳學菌株的培養
AzideDextroseBroth
緩沖李氏菌增菌肉湯基礎添加劑*5每支加入225mlHB4186中
*肉湯基礎 Lysozyme Broth Base 用于蠟樣芽孢桿菌的*試驗
MKTTN肉湯 MKTTN Broth 250克 食品中沙門氏菌檢驗選擇性增菌
*肉湯Terrific250g/瓶用于大腸桿菌培養incubationmedia*肉湯Terrific250g/瓶用于大腸桿菌培養
腸球菌瓊脂 250g 用于腸球菌和腸道致病菌的分離培養
BufferedListeriaEnrichmentBrothSupplement
B5培養基 B5 Medium 用于植物組織培養
LIA瓊脂 Lysine Iron Agar 250克 食品中沙門氏菌生化試驗
選擇性APS肉湯基礎250g/瓶非動物源配方,用于分子生物學試驗中大腸桿菌的保存和培養incubationmedia選擇性APS肉湯基礎250g/瓶非動物源配方,用于分子生物學試驗中大腸桿菌的保存和培養
EnterococcusAgar
純度:≥95.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:粉末,以1,4-二羥基蒽醌和對甲苯胺為原料。溶于乙醇。于濃硫酸中呈藍色,稀釋后呈橄欖棕色,并伴有紫色沉淀產生
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
茜素黃GG
〖英文名稱〗:Alizarin yellow GG;Anthracene yellow GG;C.I. Mordant yellow 1;Salicyl yellow ;C.I. 14025
〖其他名稱〗:間硝基苯偶氮*;媒染黃;偏鉻黃;茜素黃G;媒染黃I;茜素黃2G;媒介黃1;2-羥基-5-[(3-硝基苯基)偶氮]苯甲酸單鈉鹽
〖CAS號〗:584-42-9
C13H8N3NaO5=309.21
〖級別〗:IND
pH變色域: