DNA 包被溶液100mL實驗步驟使用方法: 
一、交換反應 1. 實驗前需自備的試劑：7 M 醋酸銨、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應液： 成分 加入的體積 自備的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交換反應緩沖液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 滅菌的超純水 補足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端約等于 0.17 μg 的長 100 bp 的雙鏈 DNA。
3. 37℃反應 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5～10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷無水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
7. 離心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注：通過第 5～8 步操作幾乎可以除去大部分未反應的[γ-32P] ATP，如要 *將其除去時，乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質時，請在第
8 步之后進行。
DNA 包被溶液100mL實驗步驟產品介紹：

磷酸化反應標記：
A. 去磷酸化反應
1. 實驗前需自備的試劑：TE 飽和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小腸堿性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量離心管中制備下列反應液： 成分 加入的體積 自備的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小腸堿性磷酸酶 （CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 滅菌的超純水 補足到 150 μL
3. 50℃反應 30 分鐘。
4. 加入 150 μL 的 TE 飽和酚//（25：24：1），充分混勻。
5. 離心，取上層（水層）移到另一個微量離心管中。
6. 重復操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui終濃度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷無水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
9. 離心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。
磷酸化反應（前反應）：
1. 在微量離心管中制備下列反應液：

2. 37℃反應 30 分鐘。
3. 下面的操作與交換反應的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的標記：
當摻入水平很低的時候，需要使用本步驟，即通過體積排阻色譜或過濾試 劑盒除去未反應的標記。Sephadex G-50 層析柱（需另購）對于去除未摻入 的 dNTPs 效果很好，它還能大幅減少小于 20 個堿基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的雙鏈 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加熱 5～10 分鐘以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 層析柱可以用來純化長度不小于 10 個 堿基的寡核苷酸。

PCR Mix 染料    10mL    多聚甲醛
可逆型 Taq DNA 聚合酶抑制劑    0.3mL    α- 酮戊二酸鈉
Taq 酶抗體    250U    四鹽酸精胺
Taq 酶抗體    1000U    5-  -5’- 脫氧尿苷
DNA 修復混合液     30 次    潮霉素 B
DNA 修復混合液     150 次    埃文斯藍
即用型 PCR 試劑盒 2.0     1 mL    對硝基苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷
即用型 PCR 試劑盒 2.0     9 mL    L- *鹽酸鹽
探針標記 PCR Mix     0.5mL    腺嘌呤硫酸鹽
即用型 PCR 試劑盒 3.0    1 mL    酸性品紅
即用型 PCR 試劑盒 3.0    9 mL    α- 酮戊二酸
即用型熱啟動 PCR 試劑盒    1.5mL    苯甲基磺酰
免 DNA 提取 PCR 試劑盒    100 次    異硫氰酸熒光素
即用型易錯 PCR 試劑盒    100 次    亞精胺三鹽酸鹽

Ethyllaurate十二酸乙酯100克AR，99%
A.C.E.™BUFFER10X,TINTEDA.C.E. 測序緩沖液 (10X 帶顏色)測序級淡粉色無混濁液體RTsigma
EosinYfreeacidalcoholsoluble伊紅Y(醇溶)1毫升BR，98%
TRISBUFFEREDSALINE(TBS)TAETSTBS片超純級白色圓片RTsigma
Econazolenitrate氯苯咪唑100uBR
ACETONITRILE乙腈ACS級透明無色液體RT不sigma
D-TheronineD-α-氨基-β-羥基丁酸5克BR，99%
SODIUMDODECYLSULFATE十二烷基鈉蛋白組學級白色至米白色精細粉末RTsigma
D-PhenylalaninolD(+)-2-氨基-3-苯基-1-丙醇25克BR，98%
ACRYLAMIDE丙烯酰胺蛋白組學級白色結晶RTsigma
DNaseII5克BR，20-40u/mg，杏仁
β-巰基乙醇蛋白組學級透明無色液體RT不sigma
D-LysineHCLD-氫氯賴氨酸5克BR，99%
縮寫：L-P