DNA 溶解液10mL說明書產品介紹：

DNA 溶解液10mL說明書使用方法: 
一、交換反應 1. 實驗前需自備的試劑：7 M 醋酸銨、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應液： 成分 加入的體積 自備的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交換反應緩沖液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 滅菌的超純水 補足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端約等于 0.17 μg 的長 100 bp 的雙鏈 DNA。
3. 37℃反應 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5～10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷無水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
7. 離心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注：通過第 5～8 步操作幾乎可以除去大部分未反應的[γ-32P] ATP，如要 *將其除去時，乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質時，請在第
8 步之后進行。
磷酸化反應標記：
A. 去磷酸化反應
1. 實驗前需自備的試劑：TE 飽和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小腸堿性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量離心管中制備下列反應液： 成分 加入的體積 自備的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小腸堿性磷酸酶 （CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 滅菌的超純水 補足到 150 μL
3. 50℃反應 30 分鐘。
4. 加入 150 μL 的 TE 飽和酚//（25：24：1），充分混勻。
5. 離心，取上層（水層）移到另一個微量離心管中。
6. 重復操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui終濃度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷無水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
9. 離心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。 

10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。
磷酸化反應（前反應）：
1. 在微量離心管中制備下列反應液：

2. 37℃反應 30 分鐘。
3. 下面的操作與交換反應的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的標記：
當摻入水平很低的時候，需要使用本步驟，即通過體積排阻色譜或過濾試 劑盒除去未反應的標記。Sephadex G-50 層析柱（需另購）對于去除未摻入 的 dNTPs 效果很好，它還能大幅減少小于 20 個堿基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的雙鏈 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加熱 5～10 分鐘以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 層析柱可以用來純化長度不小于 10 個 堿基的寡核苷酸。

DAB 法雜交試劑盒    5次    鏈脲佐菌素
TMB 法雜交試劑盒    5次    *
DAB 法*雜交試劑盒    5次    橙黃G鈉
TMB 法*雜交試劑盒    5次    鄰聯茴香胺
ECL 法雜交檢測試劑盒    5次    3- 苯甲酰丙酸
ECL 法*雜交檢測試劑盒    5次    *鹽酸鹽
AP 標記的抗抗體    10μL    牛磺酸脫氧膽酸鈉
AP 標記的抗*抗體    10μL    β- 氨基丙
HRP 標記的抗抗體    10μL    P- 硝基苯基磷酸*
HRP 標記的抗*抗體    10μL    硝苯吡啶
顯影定影套裝    1套    尿苷 -5'- 二磷酸
顯影粉    1袋    鹽酸*
定影粉    1袋    四氧嘧啶

HOTSTARTTAQPCRMASTERMIX,2X熱啟動Taq PCR Master Mix生物技術級無色透明液體 -20 degrees Csigma
Manganese錳10毫克AR，40%
VisiGlo™PrimeHRPChemiluminescentSubstrateKitVisiGlo™ Prime HRP化學發光底物試劑盒RTsigma
gluconate*鹽10克BR，土豆來源
NONIDET®P-40SUBSTITUTENP-40 替代物試劑級無色至微黃色粘稠液體RTsigma
L-ValineL-α-氨基異戊酸10克BR，99%
MESBUFFERANHYDROUSMES緩沖液,無水高純級白色結晶粉末RTsigma
L-Pyroglutamicacid(S)-(-)-2-吡咯烷酮-5-羧酸10克BR，99%
GLYCEROLGELLOADINGDYE,5X5X核酸電泳上樣緩沖液,30%甘油超純級暗紫色微粘稠液體COLDsigma
L-MethionineL-蛋氨酸25克BR，99%
PHOSPHATEBUFFERSALINE(PBS)TAETS,100MLPBS片生物技術級白色凹片RTsigma
LissaminerhodamineB酸性羅丹明B1克BS
pH4.0STANDARDpH標準液4.0生物技術級粉色無混濁溶液RTsigma
L-GlutamineL-(+)-2-氨基-5-酰胺酸25克BR，99%
STREPTAVIDIN鏈霉親合素生物技術級白色結晶粉末FROZENsigma
，99%，規