單細胞全基因組擴增試劑盒30 次實驗步驟合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
單細胞全基因組擴增試劑盒30 次實驗步驟按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現 1.1Kb 的片段（如果使用隨機引物，將出現多個小片段）。
產品介紹：
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶，內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提 供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
〖保存〗：RT
苯芴酮
〖英文名稱〗：Phenylfluorone；2,6,7-Trihydroxy-9-phenylisoxanthen-3-one；Florone black；9-Phenyl-2,6,7-trihydroxy-3-fluorone；2,6,7-Trihydroxy-9-phenyl-3H-xanthen-3-one；9-Phenyl-2,3,7-trihydroxy-6-fluorone 2,3,7-Trihydroxy-9-phenylxanthen-6-one；2,6,7-Trihydroxy-9-phenylfluor
〖其他名稱〗：鍺試劑；苯基芴酮；苯基熒光酮；2,6,7-三羥基-9-苯基熒光酮；2,6,7-三羥基-9-苯基-3H-呫噸-3-酮；9-苯基-2,3,7-三羥基-6-氧蒽酮；2,6,7-三羥基-9-苯基-6-熒光酮；9-苯基-2,3,7-三羥基-6-熒光酮
〖CAS號〗：975-17-7
C19H12O5=320.30
〖級別〗：AR
乙醇溶解試驗：合格
對鍺靈敏度試驗：合格
〖灼燒殘渣〗(以〖硫酸鹽〗計)：≤0.1%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：橙紅色結晶性粉末。易溶于堿，溶于乙醇鹽酸和乙醇硫酸的混合液，微溶于乙醇，不溶于水、苯和氯方。〖熔點〗>300℃。zui大吸收波長 552nm。
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)光度測定鍺、鉬、鈮、銻、錫和鉭等。
〖保存〗：RT，避光
1-苯基-3-甲基-4-苯甲酰基吡唑啉酮
〖英文名稱〗：HPMBP；PMBP；4-Benzoyl-3-methyl-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one
〖其他名稱〗：1-苯基-3-甲基-4-苯甲酰基-5-吡唑啉酮；4-苯甲酰基-3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮；萃取劑II；4-苯甲酰-3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮；4-苯甲酰基-3-甲基-1-苯基-2-吡唑-5-酮
〖CAS號〗：4551-69-3
C17H14N2O2=278.31
〖級別〗：AR
SP600125(JNK 抑制劑 ) JM107 菌種
Spermidine.trihvdrochloride(nNOS 抑制劑 ) JM109(DE3) 菌種
Staurosporine(PKC 抑制劑 ) K802 菌種
Superoxide dismutase( 抗氧化酶 ) M15 菌種
TLR4 激活劑 Novablue(DE3) 菌種
Tocopherol( 抗氧化劑 ) Origami(DE3) 菌種
Trequinsin(PDE III 抑制劑 ) Origami B(DE3) 菌種
Trichostatin A(HDAC 抑制劑 ) Origami(DE3)plysS 菌種
U0126(MEK1/2 抑制劑 ) Rosetta 菌種
Vinblastine( 長春新堿 ) RosettaBlue(DE3) 菌種
Wortmannin(PI3K 抑制劑 ) BL21（DE3）菌種
Z-VAD-FMK(Caspase Inhibitor) SG1117 菌種
敏 PCR 法
