【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細胞名稱  人胚胎氣管組織來源細胞；CCC-HBE-2培養
形態特性  
生長特性  貼壁生長
特征特性   取材自引產的11周男性胚胎組織，該細胞由中國醫學*基礎醫學研究所細胞資源中心建立。 
培養條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  20%FBS
傳代方法   1:3傳代；3~4天1次。
傳代情況  P4
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養法（-）
STR   
同工酶  
染色體   
使用權限  A類

復蘇操作要點： 
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。 
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。 
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。 
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。 
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
人操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
gfFLT-3    英文名稱：    FMS樣*激酶3    ?0.2ml
Phospho-FLT3(Tyr591)    英文名稱：    磷酸化FMS樣*激酶3    ?0.1ml
Phospho-FLT3 (Tyr589 + Tyr591)    英文名稱：    磷酸化FMS樣*激酶3    ?0.1ml
Phospho-FLT3 (Tyr842)    英文名稱：    磷酸化FMS樣*激酶3    ?0.1ml
Phospho-FLT3 (Tyr969)    英文名稱：    磷酸化FMS樣*激酶3    ?0.1ml
Phospho-c-Fos (Ser32)    英文名稱：    磷酸化c-fos抗體    ?0.1ml
Phospho-c-Fos(Thr232)    英文名稱：    磷酸化c-fos抗體    ?0.1ml
Phospho-c-Fos (Thr325)    英文名稱：    磷酸化c-fos抗體    ?0.1ml
FIH1    英文名稱：    缺氧誘導因子1α抑制蛋白抗體    ?0.2ml
F1 operon positive regulatory protein(NT)    英文名稱：    肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體（N端）    ?0.2ml
Factor H    英文名稱：    補體因子H抗體    ?0.1ml
FSH beta    英文名稱：    促卵泡刺激素抗體    ?0.1ml
FOX3    英文名稱：    神經元核抗原抗體    ?0.1ml
FAM135B    英文名稱：    FAM135B蛋白抗體    ?0.2ml
Fibulin 1    英文名稱：    “衰老關鍵蛋白”抗體    ?0.2mlHCG(Human Chorionic Gonadotrophin) ELISA Kit  人絨毛膜促腺激素    Multi-class antibodies    規格：     48T
Beta-CG(Human Chorionic Gonadotrophin Beta) ELISA Kit  人絨毛膜促腺激素β    Multi-class antibodies    規格：     48T
LH(Human luteotropic hormone) ELISA Kit  *    Multi-class antibodies    規格：     48T
PS(Human Prednisolone) ELISA Kit  人*龍    Multi-class antibodies    規格：     48T
LEP(Human Leptin) ELISA kit  人瘦素    Multi-class antibodies    規格：     48T
LR/Ob-R(Human Leptin receptor) ELISA KIT  人苗條素受體    Multi-class antibodies    規格：     48T
HGH(Human growth hormone) ELISA KIT  人生長激素    Multi-class antibodies    規格：     48T
EPO(Human Erythropoietin) ELISA Kit  人紅細胞生成素    Multi-class antibodies    規格：     48T
EPOR(Human Erythropoietin receptor) ELISA Kit  人紅細胞生成素受體    Multi-class antibodies    規格：     48T
TUBB(Human Beta-tubulin) ELISA kit  人β-微管蛋白    Multi-class antibodies    規格：     48T
PGF2 Alpha(Human Prostaglandin F2 Alpha) ELISA Kit  人前列腺素F2α    Multi-class antibodies    規格：     48T
tPSA(Human total prostate s pecific antigen) ELISA Kit  人總前列腺特異抗原    Multi-class antibodies    規格：     48T