產品名稱 | 生長特性 | 發貨地 | 貨期 |
人正常角膜上皮細胞;HNCEC/HL-008復蘇 | 貼壁生長 | 上海 | 3-5天 |
細胞名稱 人正常角膜上皮細胞;HNCEC/HL-008復蘇
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
phospho-HDAC8 (Ser39) 英文名稱: 磷酸化組蛋白去乙酰化酶8抗體 ?0.1ml
HLA-DR 英文名稱: HLA-DR抗體 ?0.1ml
HLA G 英文名稱: 人類白細胞抗原G抗體 ?0.1ml
HMGA2 英文名稱: 高遷移率族蛋白A2抗體 ?0.1ml
HMGB1 英文名稱: 高遷移率族蛋白B1抗體 ?0.1ml
HO-2 英文名稱: 血紅素氧合酶2抗體 ?0.1ml
HOXc8 英文名稱: HOXc8抗體 ?0.1ml
HRAS 英文名稱: 原癌基因H-ras抗體 ?0.1ml
HSP60 英文名稱: 熱休克蛋白-60抗體 ?0.1ml
HSP70 英文名稱: 熱休克蛋白-70抗體 ?0.1ml
HSP90 alpha 英文名稱: 熱休克蛋白90α抗體 ?0.2ml
HSP90 beta 英文名稱: 熱休克蛋白90β/HSP90 β 抗體 ?0.1mlHuman ALR ELISA Kit 人肝再生增強因子 Multi-class antibodies 規格: 96T
Human T-box protein 3 ELISA Kit(human) 人轉錄因子Tbx3 ELISA試劑盒 Multi-class antibodies 規格: 96T
human HMGB-1 ELISA Kit 人高遷移率族蛋白B1 ELISA Kit Multi-class antibodies 規格: 96T
GATA4 ELISA Kit muman 人GATA結合蛋白4 ELISA試劑盒 Multi-class antibodies 規格: 96T
ACV-RAb(Rat anti-Activin A receptor antibody,ACV-RAb )ELISA Kit 大鼠活化素A受體抗體 Multi-class antibodies 規格: 48T
NGB(Rat Neuroglobin,NGB) ELISA Kit 大鼠腦紅蛋白 Multi-class antibodies 規格: 48T
TPO(Rat Thrombopoietin,TPO )ELISA kit 大鼠血小板生成素 Multi-class antibodies 規格: 48T
(BAX)Rat Bcl-2 associated X protein,Bax ELISA Kit 大鼠Bcl-2相關X蛋白 Multi-class antibodies 規格: 48T
sFAS/Apo-1(Rat soluble Factor-related Apoptosis,sFAS/Apo-1 )ELISA Kit 大鼠可溶凋亡相關因子 Multi-class antibodies 規格: 48T
MBP/MBL (Rat Mannma binding protein/mannan binding lectin,MBP/MBL) ELISA Kit Rat Mannma binding protein/mannan binding lectin Multi-class antibodies 規格: 48T
IL-7(Rat Interleukin-7) ELISA kit 大鼠白介素7 Multi-class antibodies 規格: 48T
STK(Reat serine/threonine protein kinase,STK) ELISA Kit 大鼠*/*蛋白磷酸酶 Multi-class antibodies 規格: 48T