【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細胞名稱  人肺轉化細胞；AE1201培養
形態特性   成纖維細胞樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細胞屬保藏，其特征特性尚未公開。 
培養條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況  C6
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權限  未定

復蘇操作要點： 
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。 
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。 
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。 
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。 
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
(DC-SIGN/CD209)ELISA Kit  大鼠樹突狀細胞表面特異C型凝集素-細胞間黏附分子3結合非整合素分子    Multi-class antibodies    規格：     48T
(P I NP)ELISA Kit  大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽    Multi-class antibodies    規格：     48T
(ADAM9)ELISA Kit  大鼠解整合素樣金屬蛋白酶9    Multi-class antibodies    規格：     48T
大鼠c-fos ELISA Kit  大鼠c-fos    Multi-class antibodies    規格：     48T
大鼠c-jun ELISA Kit   大鼠c-jun ELISA Kit    Multi-class antibodies    規格：     48T
sIL-6R ELISA Kit  大鼠可溶白介素6受體    Multi-class antibodies    規格：     48T
PYD ELISA Kit  大鼠吡啶酚    Multi-class antibodies    規格：     48T
BACE2 ELISA Kit  大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2    Multi-class antibodies    規格：     48T
BALP ELISA Kit  大鼠骨堿磷酸酶    Multi-class antibodies    規格：     48T
IL-32 ELISA Kit  大鼠白介素32    Multi-class antibodies    規格：     48T
PROGR ELISA kit   大鼠孕酮受體    Multi-class antibodies    規格：     48THABP2    英文名稱：    透明質酸結合蛋白2抗體    ?0.1ml
HAPLN2    英文名稱：    透明質酸及粘蛋白2抗體    ?0.2ml
HAS3    英文名稱：    透明質酸合成酶3抗體    ?0.2ml
FKBP52    英文名稱：    熱休克蛋白56抗體    ?0.2ml
HSPABP/HIP/HSC70 Interacting Protein HIP    英文名稱：    熱休克蛋白70相互作用蛋白抗體    ?0.2ml
DNAJA1    英文名稱：    熱休克蛋白相關蛋白4抗體    ?0.2ml
HAS2    英文名稱：    透明質酸合成酶2抗體    ?0.1ml
HOXA3    英文名稱：    同源盒基因HOXA3蛋白抗體    ?0.1ml
HOXA4    英文名稱：    同源盒基因HOXA4蛋白抗體    ?0.1ml
HOXA6    英文名稱：    同源盒基因HOXA6蛋白抗體    ?0.1ml
HOXA7    英文名稱：    同源盒基因HOXA7蛋白抗體    ?0.1ml
HSD17B4    英文名稱：    羥基類固醇(17β)脫氫酶4/17β-HSD4抗體    ?0.1ml
HBZ    英文名稱：    血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ 抗體    ?0.2ml