| 產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
| 人類成纖維細(xì)胞系；CNLMG-B5537SKIN特性 | 貼壁生長(zhǎng) | 上海 | 3－5天 |
細(xì)胞名稱 人類成纖維細(xì)胞系；CNLMG-B5537SKIN特性
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C6
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
來(lái)源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無(wú)菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
HOXA9 英文名稱： 同源盒蛋白HOXA9抗體 ?0.1ml
HOXB5 英文名稱： 同源盒蛋白HOXB5抗體 ?0.1ml
HEPACAM 英文名稱： 肝細(xì)胞粘附分子抗體 ?0.2ml
Phospho-HDAC5 (Ser259) 英文名稱： 磷酸化組蛋白去乙酰化酶5抗體 ?0.1ml
phospho-HDAC1 (Ser423+Ser421) 英文名稱： 磷酸化組蛋白去乙酰化酶1抗體 ?0.1ml
phospho-HDAC2 (Ser394) 英文名稱： 磷酸化組蛋白去乙酰化酶2抗體 ?0.1ml
phospho-HOMER3 (Thr36) 英文名稱： 磷酸化HOMER3蛋白抗體 ?0.1ml
HRAS+KRAS 英文名稱： 轉(zhuǎn)化蛋白p21抗體（原癌基因H-ras抗體） ?0.2ml
HES1 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄因子HES-1抗體 ?0.2ml
H3-K4-HMTase SETD7 英文名稱： 組蛋白H4-K4甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 ?0.2ml
HOMER3 英文名稱： HOMER3蛋白抗體 ?0.2ml
Phospho-HER3(Tyr1328) 英文名稱： 磷酸化HER3受體抗體 ?0.1mlc ELISA Kit 大鼠心肌特異肌鈣蛋白T Multi-class antibodies 規(guī)格： 48T
AChE ELISA Kit 大鼠乙酰*酯酶 Multi-class antibodies 規(guī)格： 48T
CDT ELISA Kit 大鼠糖缺失轉(zhuǎn)鐵蛋白 Multi-class antibodies 規(guī)格： 48T
TBA ELISA Kit 大鼠總膽汁酸 Multi-class antibodies 規(guī)格： 48T
BMG/ Beta2-MG ELISA Kit 大鼠β2微球蛋白 Multi-class antibodies 規(guī)格： 48T
RBP ELISA Kit 大鼠*結(jié)合蛋白 Multi-class antibodies 規(guī)格： 48T
GNRHR-Ab ELISA Kit 大鼠促腺激素釋放激素受體抗體 Multi-class antibodies 規(guī)格： 48T
MBP ELISA Kit 大鼠主要堿蛋白 Multi-class antibodies 規(guī)格： 48T
ECP ELISA Kit 大鼠嗜酸粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白 Multi-class antibodies 規(guī)格： 48T
CaN ELISA Kit 大鼠鈣調(diào)磷酸酶 Multi-class antibodies 規(guī)格： 48T
INHBP ELISA Kit 大鼠抑制素結(jié)合蛋白 Multi-class antibodies 規(guī)格： 48T
TPO-Ab ELISA Kit 大鼠抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體 Multi-class antibodies 規(guī)格： 48T
AIF ELISA Kit 大鼠凋亡誘導(dǎo)因子 Multi-class antibodies 規(guī)格： 48T
