產品名稱 | 生長特性 | 發貨地 | 貨期 |
人皮膚成纖維樣細胞;HSF2復蘇 | 貼壁生長 | 上海 | 3-5天 |
細胞名稱 人皮膚成纖維樣細胞;HSF2復蘇
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一男性的皮膚組織,2009年由中科院昆明細胞庫建立。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
7N9 HA 英文名稱: A型病毒H7N9 M1蛋白抗體 ?0.2ml
HCG alpha 英文名稱: 人絨毛膜促腺激素α亞基/hCG α 抗體 ?0.1ml
Heparanase 1 英文名稱: 乙酰肝素酶抗體 ?0.1ml
Centromeric histone H3-like protein-2 英文名稱: 組蛋白H3樣蛋白抗體 ?0.2ml
HHLA1 英文名稱: HHLA1蛋白抗體 ?0.2ml
heavy chain cardiac Myosin 英文名稱: 心肌肌球蛋白重鏈抗體 ?0.1ml
hnRNP M 英文名稱: 異質核糖核蛋白M抗體 ?0.2ml
HE4 英文名稱: 附睪分泌蛋白4抗體 ?0.2ml
HBLD1 英文名稱: 鐵硫簇整合同源物2蛋白抗體 ?0.2ml
HIGD2A 英文名稱: HIG1區域家族成員2A抗體 ?0.2ml
Hpt/Haptoglobin 英文名稱: 結合珠蛋白/觸珠蛋白抗體 ?0.1ml
HMGB4 英文名稱: 高遷移率族蛋白B4抗體 ?0.1mlPP ELISA Kit 大鼠蛋白磷酸酶 Multi-class antibodies 規格: 48T
TrxR ELISA Kit 大鼠硫氧還蛋白還原酶 Multi-class antibodies 規格: 48T
Trx ELISA Kit 大鼠硫氧化還原蛋白 Multi-class antibodies 規格: 48T
Collagenase II ELISA Kit 大鼠膠原酶II Multi-class antibodies 規格: 48T
TREM-1 ELISA Kit 大鼠髓系細胞觸發受體-1 Multi-class antibodies 規格: 48T
Collagenase I ELISA Kit 大鼠膠原酶I Multi-class antibodies 規格: 48T
P-PKC ELISA Kit 大鼠磷酸化蛋白激酶C Multi-class antibodies 規格: 48T
pERK ELISA Kit 大鼠磷酸化細胞外信號調節激酶 Multi-class antibodies 規格: 48T
cath-K ELISA Kit 大鼠組織蛋白酶K Multi-class antibodies 規格: 48T
AmAC-1 ELISA Kit 大鼠巨噬細胞替代激活相關化學因子1 Multi-class antibodies 規格: 48T
BMPs ELISA Kit 大鼠骨形成蛋白 Multi-class antibodies 規格: 48T
RBP-4 ELISA Kit 大鼠*結合蛋白4 Multi-class antibodies 規格: 48T
6-keto-PGF1a ELISA Kit 大鼠6酮前列腺素F1a Multi-class antibodies 規格: 48T