人胚胎皮膚成纖維細(xì)胞；HES特性來(lái)源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無(wú)菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

細(xì)胞名稱  
形態(tài)特性   成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性  貼壁生長(zhǎng)
特征特性   該細(xì)胞系來(lái)源于一男性胚胎的皮膚組織。2005年由*昆明細(xì)胞庫(kù)建立。 
培養(yǎng)條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  15%NBS
傳代方法   1：2傳代；3-4天一次
傳代情況  P3
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)  熒光法（-）
STR   -
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  A類

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
HSPBAP1    英文名稱：    熱休克蛋白27相關(guān)蛋白1抗體    ?0.1ml
HMBS    英文名稱：    卟膽原脫氨酶抗體    ?0.2ml
HORMAD2    英文名稱：    異質(zhì)核糖核蛋白U2樣蛋白抗體    ?0.2ml
HRP2    英文名稱：    肝癌衍生生長(zhǎng)因子2抗體    ?0.2ml
HCA57    英文名稱：    肝癌相關(guān)抗原57抗體    ?0.2ml
Complement C3    英文名稱：    補(bǔ)體C3抗體    ?0.1ml
H1N1 Hemagglutinin 2    英文名稱：    甲型流感病毒血凝素抗體    ?0.1ml
HRPT2    英文名稱：    甲狀旁腺功能亢進(jìn)蛋白2/細(xì)胞分裂周期73抗體    ?0.2ml
HTRA2    英文名稱：    線粒體*蛋白酶抗體    ?0.2ml
HCN2    英文名稱：    鉀/鈉超極化激活環(huán)核苷酸門控通道蛋白2抗體    ?0.2ml
HSPβ7    英文名稱：    熱休克蛋白β7抗體    ?0.2ml
HCN3    英文名稱：    鉀/鈉超極化激活環(huán)核苷酸門控通道蛋白3抗體    ?0.1ml
Hepcidin-25    英文名稱：    鐵調(diào)節(jié)蛋白25抗體    ?0.1mlBMP-6 ELISA Kit  大鼠骨形成蛋白6    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
大鼠淋巴細(xì)胞因子ELISA Kit  大鼠淋巴細(xì)胞因子    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
mALB ELISA Kit  大鼠微量蛋白    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
AcSDKP ELISA Kit  大鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-*    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
PA-IgG/M/A ELISA Kit  大鼠抗血小板抗體IgG/M/A    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
NTX)ELISA Kit  大鼠Ⅰ型膠原N末端肽    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
HSP-27 ELISA Kit  大鼠熱休克蛋白27    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
大鼠Smad1 ELISA Kit   大鼠Smad1    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
大鼠Smad7 ELISA Kit   大鼠Smad7    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
26S PSM ELISA Kit   大鼠26S蛋白酶體    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
TIEG1 ELISA Kit   大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T