人胚肺二倍體細胞；KMB-17復蘇來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室，可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

細胞名稱  人胚肺二倍體細胞；KMB-17復蘇
形態特性   成纖維細胞樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細胞系來自于一個4周齡女性胚胎的正常肺組織，于1975年在中國醫學*昆明醫學生物學研究所建立；可作為轉染宿主，用于肺損傷或分化的研究。 
培養條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)   15%NBS
傳代方法   1:2傳代；3-4天一次
傳代情況  PN6
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  熒光法（-）
STR   -
同工酶  
染色體  
使用權限  A類

細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。
HEATR6    英文名稱：    癌增強蛋白抗體    ?0.2ml
Histone H3 (mono methyl K79)    英文名稱：    單甲基組蛋白H3K9抗體    ?0.2ml
HDHD2B    英文名稱：    HDHD2B蛋白抗體    ?0.2ml
HAX1    英文名稱：    造血干細胞特異相關結合蛋白1抗體    ?0.2ml
H-2Dd    英文名稱：    I類組織相容H-2抗原D-Dalpha鏈抗體    ?0.2ml
HEATR5A    英文名稱：    HEAT重復內含蛋白5A蛋白抗體    ?0.2ml
HSP70    英文名稱：    熱休克蛋白70抗體    ?0.1ml
HSD17B8    英文名稱：    羥類固醇脫氫酶17β抗體（17β-HSD8）    ?0.2ml
HABP4    英文名稱：    透明質酸結合蛋白4抗體    ?0.2mlvAlpha-GST ELISA Kit  大鼠α*S轉移酶    Multi-class antibodies    規格：     48T
Hcy ELISA Kit  大鼠同型半*    Multi-class antibodies    規格：     48T
GR- Beta ELISA Kit  大鼠糖皮質激素受體β    Multi-class antibodies    規格：     48T
GR- Alpha ELISA Kit  大鼠糖皮質激素受體α    Multi-class antibodies    規格：     48T
Col IV ELISA KIT  大鼠Ⅳ型膠原    Multi-class antibodies    規格：     48T
HK ELISA Kit  大鼠己糖激酶    Multi-class antibodies    規格：     48T
GSK ELISA Kit  大鼠糖原合成酶激酶    Multi-class antibodies    規格：     48T
CXCL16 ELISA Kit  大鼠CXC趨化因子配體16    Multi-class antibodies    規格：     48T
u-T3 ELISA Kit  大鼠高敏三碘甲狀腺原氨酸    Multi-class antibodies    規格：     48T

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