考馬斯亮藍 R-25010g實驗步驟產品介紹:
考馬斯亮藍 R-25010g實驗步驟規格及成分:
產品及特點:
蛋白質樣品的制備是 2D 電泳成功的關鍵,尤其是對植物材料,因為植物材料 不但有堅硬的細胞壁,還含有大量的、可以干擾 2D 電泳的物質(如多糖、脂類、 多酚、次生代謝物等)。本產品就是專門針對這一困難而開發,它有下列特點:
1. 可以處理各種植物材料(葉片、種子、果實等),包括新鮮或凍干的材料。
2. 操作簡單,只有振蕩和離心等簡單步驟。 3. 能有效去除植物樣品中常見的、干擾 2D 電泳的物質。
使用方法:
1、 稱取 0.1-0.5g 植物組織(如果是葉片,一般用 0.2g 即可;如果是含水分多的 果實,一般用 0.3-0.5g;如果是種子,一般用 0.1g 即可),放入液氮中研磨 成粉末。
2、 加入 1 mL 溶液 A,在冰上繼續研磨至成糊狀。注意:如果樣品富含蛋白酶, 還可以在溶液 A 中加入相應的蛋白酶抑制劑(自備)。
3、 將研磨液轉移到一個干凈的 1.5mL 塑料離心管中,顛倒混勻后 4℃ 15000g 離心 15 分鐘。
4、 將上清液轉移到一個新的 1.5mL 塑料離心管中。
5、 加入 100 uL 溶液 B,顛倒混勻。
6、 在冰上放置 15 分鐘或在-20℃冰箱過夜。
7、 4℃ 15000g 離心 15 分鐘,小心移棄上清液。
8、 向沉淀物加入 1mL -20℃預冷的溶液 C,震蕩混合。
9、 4℃ 15000g 離心 10 分鐘,移棄上清液。
10、重復步驟 8 和 9 一次
11、加入 1mL -20℃預冷的溶液 D,震蕩混合后 4℃ 15000g 離心 10 分鐘,去 凈上清液。
12、冷凍干燥 1~2 分鐘,沉淀即可放冰箱保存或加入 200uL 自備的等電聚焦上樣 液在室溫下(溫度不要超過 30℃)溶解 30 分鐘,再室溫 10000g 離心 2 分 鐘,將上清液轉移到一個新的 1.5mL 塑料離心管中。后續試驗包括 Bradford 蛋白定量和 2D 電泳。2D 電泳對蛋白上樣量要求十分嚴格,因此強烈建議用 戶在進行 2D 電泳前測定所得蛋白的濃度。
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:綠色結晶性粉末,有金屬光澤。主要為五甲基副品紅堿。溶于水和乙醇,呈藍紫色溶液。也有以六甲基副品紅堿稱為甲基紫6B的
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)檢定汞、銀和錫。酸堿指示劑,生物染色
〖保存〗:RT
溴甲酚紫
〖英文名稱〗:BCP ;Bromocresol purole;5',5''-Dibromo-o-cresolsulfonephthalein
〖其他名稱〗:溴甲酚紅;二溴鄰甲酚磺呋酞;二溴鄰甲酚磺酞;二溴鄰甲酚磺酰酞
〖CAS號〗:115-40-2
C21H16Br2O5S=540.22
〖級別〗:IND
pH變色域:5.2(黃)~6.8(紫)
〖干燥失重〗:≤0.5%
氫氧溶解試驗:合格
〖灼燒殘渣〗:≤0.1%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:微黃色細小結晶。溶于乙醇和稀堿溶液,幾乎不溶于水,〖熔點〗241~242℃。有刺激性
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)酸堿指示劑、吸附指示劑。氨基酸色譜法內標。銀鹽法滴定硫氰酸鹽。分光光度法沉淀血清蛋白
〖保存〗:RT
鏈霉菌 PCR Mix 6 100 次 *
常用PCR引物 100uL L- *鹽酸鹽
加 A 試劑盒 50 次 異硫氰酸胍
加 T 試劑盒 50 次 維生素 B1
DNA 粘轉平試劑盒 20 次 二乙酸熒光素
DNA 磷酸化試劑盒 20 次 *
DNA 去磷酸化試劑盒 20 次 * A
克必隆 G 載體 2μg α- 乳糖
克必隆 B 載體 2μg 3-(3,4- 二羥基苯 )-L- *
即用型藍白 T 載體 A 型 (T7-SP6,有 MCS) 20 次 乙二胺四乙酸 (EDTA)
即用型藍白 T 載體 B 型 (T7-T3, 有 MCS) 20 次 L- *
即用型藍白 T 載體 C 型 (T7-T3,無 MCS) 20 次 β- 乙醇
即用型藍白 T 載體 D 型 ( 無啟動子,有 MCS) 20 次 氯化乙酰*
即用型藍白 T 載體 E 型 ( 無啟動子,無 MCS) 20 次 4- 氯 -1- 萘酚
可保種型藍白 T 載體 50ng *
30μg L- *