【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
產品名稱 | 人急性T淋巴細胞白血病細胞;JurkatE6-1培養 |
貨期 | 3-5天 |
發貨地 | 上海 |
細胞名稱 人急性T淋巴細胞白血病細胞;JurkatE6-1培養
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞是Jurkat-FHCRC細胞的克隆,是Jurkat細胞的衍生物。佛波酯或外源凝集素或T3單抗刺激后該細胞可產生大量的IL-2。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10% FBS
傳代方法 保持細胞密度在1×105~1×106 cells/ml之間,不超過3×106 cells/ml。
傳代情況 C15
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,12;D13S317:8,12;D16S539:11;D18S51:13,21;D19S433:14,15.2;D21S11:31.2,33.2;D2S1338:19,23;D3S1358:15;D5S818:9;D7S820:8,12;D8S1179:13,14;FGA:20,21;TH01:6,9.3;TPOX:8,10;vWA:18;
同工酶
染色體 46,XY
使用權限 A類
復蘇操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人人抗乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗乙型肝炎病毒e抗體(HBeAb)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗胰島素受體抗體(AIRA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗*(AT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗眼肌抗體(EMAb)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗胸腺細胞球蛋白(ATG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗信號識別顆粒抗體(SRP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗心肌抗體(AMA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝2-羥基嘧啶鹽酸鹽 CAS號: 38353-09-2 說明書
2-溴-4'-()苯乙酮 CAS號: 383-53-9 報價
二氟乙酯 CAS號: 383-62-0 進口、國產
2-硝基三氟甲苯 CAS號: 384-22-5 現貨供應
1,2-二氫-2-異丁氧基喹啉-1-甲酸異丁酯 CAS號: 38428-14-7 說明書
3-甲氧基丙酸甲酯 CAS號: 3852/9/3 報價
2-巰基* CAS號: 38521-46-9 進口、國產
4-甲基-5-羥甲基咪唑鹽酸鹽 CAS號: 38585-62-5 現貨供應
5-羥甲基噻唑 CAS號: 38585-74-9 說明書
(二甲氨基)乙醛縮二甲醛 CAS號: 38711-20-5 報價