產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
人急性T淋巴細胞白血病細胞;Jurkat, Clone E6-1復(fù)蘇 | 貼壁生長 | 上海 | 3-5天 |
細胞名稱 人急性T淋巴細胞白血病細胞;Jurkat, Clone E6-1復(fù)蘇
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞是Jurkat-FHCRC細胞株(Jurkat細胞株的衍生)的一個克隆。 Jurkat細胞株來源于一個14歲男孩的外周血。 經(jīng)佛波酯和外源凝集素或抗T3單克隆抗體誘導(dǎo)后可產(chǎn)生大量IL-2(IL-2的產(chǎn)生需兩種類型的誘導(dǎo)劑);表達T細胞受體、CD3.
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C10
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人急性T淋巴細胞白血病細胞;Jurkat, Clone E6-1復(fù)蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。
人急性T淋巴細胞白血病細胞;Jurkat, Clone E6-1復(fù)蘇細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
人急性T淋巴細胞白血病細胞;Jurkat, Clone E6-1復(fù)蘇操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
Agar D (Purified Agar) 純化瓊脂 500g
Casamino Acid 酪蛋氨基酸(酪蛋白水解物) 500g
Malt Extract 麥芽浸膏 500g
Yeast Extract 酵母浸膏 500g
HYLB-Capsules 培養(yǎng)基 5capsules
Peptone 140 (Soytone) 蛋白胨-140 100g
Peptone-A (From Meat) 蛋白胨A 100g
Peptone-B (Soy Protein Enzymatic Hydrolysate) 蛋白胨B 500g
Peptone-C (Peptonized Milk) 蛋白胨C 500g
Peptone-D (Protease peptone) 蛋白胨 D 100g
Peptone-E (Gelatin Peptone) 蛋白胨 E 100g
Peptone F (Lactalbumin Hydrolysate) 蛋白胨F 500g
Tryptone 胰蛋白胨 500g Phospho-Bad (Ser136) 磷酸化相關(guān)死亡促進因子抗體
Phospho-Bad (Ser155) 磷酸化相關(guān)死亡促進因子抗體
hCG beta 人β亞基人絨毛膜促腺激素(β HCG)抗體
BK channel 鈣激活鉀通道蛋白 α 1抗體
BK channel 鈣激活鉀通道蛋白 α 1抗體
Batroxobin Protein 蛇毒巴曲酶抗體
Bid BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體
Bax Bax抗體
Bcl-2 Bcl-2抗體
BDNF 腦源神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體
bFGF 堿成纖維細胞生長因子抗體
BRMS-1 癌轉(zhuǎn)移抑制基因1抗體
BSA 牛血清白蛋白抗體
Beta-casein β-酪蛋白抗體
人急性T淋巴細胞白血病細胞;Jurkat, Clone E6-1復(fù)蘇beta Glucan Receptor β葡聚糖受體抗體
Batroxobin 蛇毒蛋白巴曲酶抗體
BMX 非受體蛋白*激酶ETK抗體
Phospho-BMX (Tyr40) 磷酸化非受體蛋白*激酶ETK抗體