產品名稱 | 生長特性 | 發貨地 | 貨期 |
高轉移潛能肝癌細胞;MHCC97H-GFP-LC3特性 | 貼壁生長 | 上海 | 3-5天 |
細胞名稱 高轉移潛能肝癌細胞;MHCC97H-GFP-LC3特性
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
hospho-c-Jun(Thr91+Thr93) 磷酸化原癌基因c-Jun抗體
CLCN3 氯離子通道蛋白3抗體
phospho-Cyclin E (Thr395) 磷酸化周期素E抗體
Phospho-cdc25C (Ser216) 磷酸化細胞分裂周期蛋白25C抗體
Phospho-CDK9 (Thr186) 磷酸化周期素依賴激酶9抗體
Phospho-Connexin 43 (Ser368) 磷酸化Connexin 43蛋白抗體
cofilin 絲切蛋白抗體
phospho-Cortactin (Tyr466) 磷酸化皮層肌動蛋白抗體
Phospho-Cyclin B1 (Ser147) 磷酸化周期素B1抗體
Phospho-Cyclin B1 (Ser133) 磷酸化周期素B1抗體
Phospho-Cyclin D1 (Thr286) 磷酸化cyclin D1抗體
CD13 CD13氨肽酶N抗體麥康凱瓊脂2號 250 用于腸道致病菌的選擇性分離、培養(OXOID方法)
印度墨汁 50ml 炭疽桿菌檢測用配套試劑
碘伏(液體) 500g 炭疽桿菌檢測用配套試劑
* 2000萬單位/g 炭疽桿菌檢測用配套試劑
美藍(亞甲基藍) 25g 炭疽桿菌檢測用配套試劑
水楊素 1g 進口分裝,與HB116配套使用
MiddleBrook 7H10 瓊脂 250 用于分枝桿菌的分離培養
MiddleBrook 7H11 瓊脂 250 用于分枝桿菌的分離培養
氣單胞菌鑒別瓊脂 250 用于分離培養和鑒別氣單胞菌
*肉湯 250 用于游泳池中假單胞菌檢測(Merck方法)
曲霉素瓊脂基礎(AFPA) 250 用于曲霉菌分離培養
假單胞分離瓊脂 250 用于假單胞菌群的測定