【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
| 產品名稱 | Imatinib耐藥的胃腸道間質瘤細胞系；GIST-1210培養(yǎng) |
| 貨期 | 3－5天 |
| 發(fā)貨地 | 上海 |
細胞名稱 Imatinib耐藥的胃腸道間質瘤細胞系；GIST-1210培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
復蘇操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
QBC-939, 人膽管癌細胞
B16-F10, 小鼠黑色素瘤高轉移細胞
SGC-7901, 人胃腺癌細胞系
SK-N-SH, 人神經(jīng)母細胞瘤細胞
SK-MEL-1, 人皮膚黑色素瘤細胞
A549, 人肺癌細胞系
SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌*耐藥細胞株
A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細胞株
A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細胞株
SP2/0, 小鼠骨髓瘤細胞 Phospho-CDK2 (Thr14) 磷酸化周期素依賴激酶2抗體
pphospho-CBL2 (Tyr674) 磷酸化原癌基因CBL2抗體
Cadherin like 23 鈣粘蛋白23抗體
CDR2 小腦變相關蛋白2抗體
CRK7 細胞分裂周期2相關蛋白激酶7抗體
CPa(Clostridium perfringens alpha toxin) A型產氣莢膜梭菌(魏氏梭菌)
phospho-CK18(Ser34) 磷酸化細胞角蛋白18抗體
Cytosine deaminase 胞嘧啶脫氨酶抗體
C2GNT3 C2GNT3蛋白抗體
phospho-c-Jun(Thr239) 磷酸化原癌基因c-Jun抗體
phospho-c-Jun(Thr249) 磷酸化原癌基因c-Jun抗體
CYFRA21-1 腫瘤標志物CYFRA21-1抗體
