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人結腸癌細胞;CaCo-2培養(yǎng)

參考價面議
具體成交價以合同協議為準
  • 公司名稱上海撫生實業(yè)有限公司
  • 品       牌
  • 型       號
  • 所  在  地上海
  • 廠商性質代理商
  • 更新時間2017/1/23 14:39:46
  • 訪問次數607
產品標簽:

人結腸癌細胞CaCo-2

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  上海撫生實業(yè)有限公司成立于2012年,經過數年的努力已迅速成為集科研和為一體的專業(yè)化生物工程公司。特別是ELISA,代測,技術服務這一產品已使上海撫生成為中國公司。

公司產品涵蓋ELISA、細胞培養(yǎng),各種生化試劑、各種酶類、分子生物學試劑盒、培養(yǎng)基、自產實驗室耗材、小型儀器等。此外、上海撫生還代理了美國藥典標準品,中檢所標準品,sigma,ScienCell,ATCC,wak0,omega,Worthington、MBI、Bioworld、Calendon等國外各類公司的產品。

上海撫生將進一步加強人才經營、產品經營,不斷提升企業(yè)的核心竟爭力,實現具有產業(yè)體系、知識化創(chuàng)業(yè)團隊的化的公司,服務于生命科學領域,迎接世界經濟一體化所帶來的機遇與挑戰(zhàn)。

elisa試劑盒,ATCC細胞,標準品,培養(yǎng)基
人結腸癌細胞;CaCo-2培養(yǎng)細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
人結腸癌細胞;CaCo-2培養(yǎng) 產品信息
產品名稱 人結腸癌細胞;CaCo-2培養(yǎng)
貨期3-5天
發(fā)貨地上海

細胞名稱  人結腸癌細胞;CaCo-2培養(yǎng)
形態(tài)特性   上皮樣細胞
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細胞系分離自一個原發(fā)性直腸癌。 當細胞長滿時,表現出典型的腸上皮細胞分化特征。表達維甲酸結合蛋白I和維甲酸結合蛋白II,角蛋白陽性。 
培養(yǎng)條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  15%FBS
傳代方法   1:2傳代;3-4天一次
傳代情況  PN3
凍存條件   基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  熒光法(-)
STR   Amelogenin:X;CSF1PO:11;D13S317:11,14;D16S539:12;D18S51:12;D19S433:15;D21S11:30;D2S1338:17,25;D3S1358:17;D5S818:12,13;D7S820:11,12;D8S1179:12;FGA:19;TH01:6;THOX:9,11;vWA:16,18;D3S1358: 17; TH01: 6; D13S317: 11,14; D16S539: 12; D2S1338: 17, 25; D19S433: 15;
同工酶  無
染色體   88-98
使用權限  A類

復蘇操作要點: 
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。 
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。 
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。 
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
CM-H124    人腦微血管內皮細胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R002    大鼠肺血管平滑肌細胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R003    大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R004    大鼠氣管上皮細胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R005    大鼠氣管平滑肌細胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R006    大鼠肺成纖維細胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R007    大鼠支氣管上皮細胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R008    大鼠支氣管成纖維細胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R009    大鼠肺大靜脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R010    大鼠肺大動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R011    大鼠肺大動脈內皮細胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R012    大鼠肺動脈成纖維細胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R013    大鼠肺大靜脈內皮細胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R014    大鼠氣管和支氣管上皮細胞*培養(yǎng)基    100mLCARD4    凋亡加強結構域蛋白4抗體
C4orf34     4號染色體開放閱讀框34抗體
CKI gamma 3    酪蛋白激酶1γ3/CKI γ3抗體
CARD9    凋亡加強結構域蛋白9抗體
Cholesterol Oxidase    *氧化酶抗體
Caspase 14    半胱胺酸蛋白酶蛋白14抗體
Caspase 5    半胱胺酸蛋白酶蛋白5抗體
CSFV    豬瘟病毒抗體
CSFV    豬瘟病毒抗體
Chromogranin C/Sg II    嗜鉻粒蛋白C抗體
CHRNA10    煙堿型乙酰*受體α10/AChRα10抗體
CHRNA6    煙堿型乙酰*受體α6/AChRα6抗體
CHRNA9    煙堿型乙酰*受體α9/AChRα9抗體
CHRND    煙堿型乙酰*受體δ/AChRδ抗體
CARD8    凋亡加強結構域蛋白8抗體

 

 

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