細胞名稱  抗SARS病毒N蛋白雜交瘤細胞；SO2使用說明書
形態(tài)特性   淋巴母細胞樣
生長特性  半貼壁生長
特征特性   可產生單克隆抗體，抗原為SARS病毒N蛋白。  
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   保持細胞密度在1×105～1×106 cells/ml之間，每周換液2～3次
傳代情況  不詳
凍存條件   基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR   -
同工酶  
染色體  
使用權限  A類

 復蘇操作要點： 
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。 
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。 
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。 
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。 
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
 操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
YM Medium        
WLN培養(yǎng)基    250g    用于釀造和工業(yè)發(fā)酵過程中細菌、酵母菌和霉菌培養(yǎng)
WLN Medium        
氯硝胺18%甘油(DG18)瓊脂    250g    用于蜂蜜中嗜滲酵母計數
DG18 Agar        
30%葡萄糖溶液(PH6.5±0.5)    250g    用于嗜滲酵母檢驗時的樣品稀釋(GB標準)
30% Dextrose Broth        
0.1%呂氏堿性美藍染色液    5ml*6支/盒    用于酵母菌鏡檢染色。
YPDA培養(yǎng)基    250g    用于酵母菌增菌培養(yǎng)
YPDA Medium        
DTM添加劑1    1ml*5    每支添加于200mlDTM培養(yǎng)基中
DTM添加劑2    1ml*5    每支添加于200ml DTM培養(yǎng)基中GALM    半乳糖脫氫酶抗體
GALNS    *裂解酶抗體
GALNT10    多肽N-乙酰氨基半乳糖轉移酶10抗體
GALNT11    多肽N-乙酰氨基半乳糖轉移酶11抗體
GALNT12    多肽N-乙酰氨基半乳糖轉移酶12抗體
GALNT1    多肽N-乙酰氨基半乳糖轉移酶1抗體
 gamma C Crystallin    晶狀體球蛋白γ3/γC-crystallin/白內障相關蛋白抗體
GCP3    γ-微管蛋白復合物GCP3抗體
GAMT    胍基乙酸N甲基轉移酶抗體
GANC    α-葡萄糖苷酶C抗體
GHRHR    生長激素釋放因子受體抗體