【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
| 產(chǎn)品名稱 | 抗肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)雜交瘤細(xì)胞；HGF2使用說明書 |
| 貨期 | 3－5天 |
| 發(fā)貨地 | 上海 |
細(xì)胞名稱 抗肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)雜交瘤細(xì)胞；HGF2使用說明書
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體，抗原為肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子HGF。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 保持細(xì)胞密度在1×105～1×106 cells/ml之間，每周換液2～3次
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
抗肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)雜交瘤細(xì)胞；HGF2使用說明書復(fù)蘇操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
抗肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)雜交瘤細(xì)胞；HGF2使用說明書操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
酪蛋白葡萄糖瓊脂 250g 用于霉菌、酵母菌等的分離培養(yǎng)
Sabouraud Dextrose Agar
沙氏葡萄糖瓊脂（含*） 250g 用于霉菌和酵母菌的分離培養(yǎng)
Sabouraud-glucose Agar with Chloramphenicol
酪蛋白葡萄糖肉湯 250g 用于霉菌、酵母菌等的增菌培養(yǎng)
Sabouraud-dextrose Broth
大豆胨酵母浸粉瓊脂（PYE） 250g 用于真菌的選擇性分離培養(yǎng)
Phytone Yeast Extract Agar
營(yíng)養(yǎng)鹽瓊脂 250g 用于檢測(cè)紡織品的抗真菌活性
Nutrient-salts Agar
WLD培養(yǎng)基 250g 用于釀造和工業(yè)發(fā)酵過程中細(xì)菌分離培養(yǎng)GUK1 鳥苷酸激酶GMK抗體
Galactocerebroside 半乳糖腦苷脂酶抗體
GRK5 G蛋白偶聯(lián)受體激酶5抗體
GTP binding protein REM1 GTP結(jié)合蛋白R(shí)EM1抗體
phospho-GSK3 Alpha(Ser21) 磷酸化糖原合酶激酶-3α抗體
GDF7 生長(zhǎng)分化因子7抗體
Glucokinase regulatory protein 葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白抗體
GCLC γ谷氨酰半*合成酶抗體（γ-GCSc）
抗肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)雜交瘤細(xì)胞；HGF2使用說明書GCOM1 GCOM1蛋白抗體
GFOD2 葡萄糖果糖還原酶2抗體
GFRAL 膠質(zhì)細(xì)胞系源神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體α1樣蛋白抗體
GHDC GHDC蛋白抗體
GK5 甘油激酶5抗體
