細胞名稱  小鼠SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細胞；SRSV/3T3培養(yǎng)
形態(tài)特性   圓形
生長特性  貼壁生長
特征特性   這株細胞是NIH/3T3細胞用SRS小鼠腹水瘤無細胞提取物感染并在體外傳代。 在感染過的NIH/3T3細胞的細胞質(zhì)中發(fā)現(xiàn)了A型和Ｃ型病毒顆粒。 發(fā)現(xiàn)細胞中有逆轉(zhuǎn)錄酶和自由的白血病病毒前病毒-DNA。 用這個培養(yǎng)細胞對BALB/c裸鼠進行皮下接種，*誘導生成纖維肉瘤。 
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  胎牛血清，10%
傳代方法   消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況  PN
凍存條件   *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  A類

復蘇操作要點： 
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。 
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。 
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
dragon牙膏稀釋緩沖液    250g    用于牙膏稀釋的稀釋液
假單胞分離肉湯    250g    用于假單胞菌群增菌培養(yǎng)
Pseudomonas Isolation Broth        
氣單胞菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)    250g    用于氣單胞菌分離培養(yǎng)
Aeromonas Medium Base(Ryan)        
氣單胞菌培養(yǎng)基添加劑    5支    每支添加劑加入100ml氣單胞菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)
布氏菌選擇性培養(yǎng)基    250g    用于布氏菌的選擇性分離培養(yǎng)
Brucella Selective Medium        
C.L.E.D培養(yǎng)基    250g    用于尿液中微生物的選擇性分離培養(yǎng)
C.L.E.D Medium        
C.L.E.D培養(yǎng)基添加劑    1ml*5支    每支加入100mlC.L.E.D培養(yǎng)基中
C.L.E.D Medium Supplement        
GC瓊脂    250g    用于淋球菌的分離培養(yǎng)(OXOID方法)Glucosidase 2 subunit beta    葡萄糖苷酶2β/Glucosidase IIβ抗體
GLUD2    *脫氫酶2抗體
phospho-GluR1 (Thr840)    磷酸化*受體1抗體
GGH    γ-谷氨酰水解酶抗體
Glutamyl Prolyl tRNA synthetase/ProRS    谷氨酰-脯氨酰-tRNA合成酶抗體
Glutaredoxin 2    谷氧還蛋白2抗體
Glutaredoxin 5    谷氧還蛋白5抗體
GPX2    *過氧化酶2抗體
GPX7    *過氧化酶7抗體
GSTA1    *S轉(zhuǎn)移酶α1抗體
GSTK1    *S轉(zhuǎn)移酶κ抗體