【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細胞名稱  小鼠B淋巴細胞系；RMS-S-B 5101使用說明書
形態特性   淋巴母細胞樣
生長特性  懸浮生長
特征特性   該細胞屬保藏，其特征特性尚未公開。 
培養條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況  C10
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權限  未定

復蘇操作要點： 
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。 
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。 
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。 
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。 
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
Steroid sulfatase    類固醇硫酸酯酶抗體
Survivin    細胞凋亡抑制因子抗體
Separase    外紡錘體極樣蛋白1抗體
phospho-STAT5a(Tyr694)    磷酸化信號轉導和轉錄激活因子5a抗體
SARS S-protein    抗冠狀病毒表面S蛋白抗體
SYAP1    突觸素抗體/突觸相關蛋白-1
Secretin    分泌素抗體
Slc22A17    可溶載質轉運蛋白22A17抗體
phospho-Src(Tyr529)    磷酸化Src原癌基因抗體
SHIP1    SH2結構含磷酸肌醇SHIP1抗體
SKI    C-SKI抗體
Phospho-SGK1 (Thr256)    磷酸化糖皮質激素調節激酶1抗體蘿芙木屬植物蛇根木 Rauwolfia serpentina Benth.    Reserpine    *    50-55-5    C33H40N2O9    ≥98%
蘿芙木Rauvolfia verticillata (Lour.)    Perakine    霹靂蘿芙木堿    4382-56-3    C21H22N2O3    ≥98%
蘿芙木Rauvolfia verticillata    Akuammidine    阿枯米定    639-36-1    C21H24N2O3    ≥95%
蘿芙木Rauvolfia verticillata    Antirhine    none    16049-28-8    C19H24N2O    ≥95%
蘿芙木Rauvolfia verticillata    Ethyl 3,4,5-trimethoxybenzoate    3,4,5-*氧基苯甲酸乙酯    6178-44-5    C12H16O5    ≥95%
蘿芙木Rauvolfia verticillata    3-Hydroxysarpagine    3-羥基蛇根精    857297-90-6    C19H22N2O3    ≥95%
蘿芙木Rauvolfia verticillata    Harman    哈爾滿堿    486-84-0    C12H10N2    ≥95%
蘿芙木Rauvolfia verticillata    Macusine B    馬枯星堿 B    6792-07-0    C20H25N2O    ≥95%
蘿芙木Rauvolfia verticillata    Pelirine    none    30435-26-8    C21H26N2O3    ≥95%
蘿芙木Rauvolfia verticillata    Sitsirikine    西特斯日欽堿    1245-00-7    C21H26N2O3    ≥95%
蘿芙木Rauvolfia verticillata    Venoterpine    (6S,7R)-6,7-二氫-7-甲基-5H-環戊并[C]吡啶-6-醇    17948-42-4    C9H11NO    ≥95%