細(xì)胞名稱  小鼠雜交瘤細(xì)胞；c7b8F10培養(yǎng)
形態(tài)特性   淋巴母細(xì)胞樣
生長特性  半貼壁生長
特征特性   可產(chǎn)生單克隆抗體。 
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況  
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  A類

 復(fù)蘇操作要點(diǎn)： 
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。 
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
 操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)免疫試劑盒    Rabbit amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA Kit
兔S100-A5蛋白(S100A5)免疫試劑盒    Rabbit Protein S100-A5,S100A5 ELISA kit
兔P物質(zhì)受體(SP-R)免疫試劑盒    Rabbit Substance-P receptor,SP-R ELISA kit
兔p物質(zhì)(SP)免疫試劑盒    Rabbit Substance P,SP ELISA Kit
兔p53(p53)免疫試劑盒    Rabbit p53/tumor protein,p53/TP53 ELISA Kit
兔N端前腦鈉素(NT-proBNP)免疫試劑盒    Rabbit N-terminal pro-brain natriuretic,NT-proBNP ELISA kit
兔NADPH氧化酶1()免疫試劑盒    Rabbit NADPH oxidase 1, ELISA kit
兔C肽(C-Peptide)免疫試劑盒    Rabbit C-Peptide ELISA kit
兔CD8分(CD8)免疫試劑盒    Rabbit Cluster of differentiation 8,CD8 ELISA Kit
兔CD4分(CD4)免疫試劑盒    Rabbit Cluster of differentiation 4,CD4 ELISA Kit
兔Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)免疫試劑盒    Rabbit Bcl-2 Assaciated X protein,BAX ELISA Kit
兔ADAM金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1型13(ADAMTS13)免疫試劑盒    Rabbit ADAM DAB complete peroxidase substrate system    shēng huà shì jì    容量：    2～8℃    25克
D-2-氨基丁酸    shēng huà shì jì    容量：        100克
D-201高等級大孔強(qiáng)堿Ⅰ型陰離子交換樹脂    shēng huà shì jì    容量：     保存-20℃    1克
D，E中和肉湯    shēng huà shì jì    容量：    RT    250克
D，E中和瓊脂    shēng huà shì jì    容量：    RT    100克
D(-)樟腦磺酸    shēng huà shì jì    容量：        25克
 D-(-)水楊苷    shēng huà shì jì    容量：        100克
D(-)酒石酸鈉    shēng huà shì jì    容量：        5克
Con A瓊脂糖凝膠4B    shēng huà shì jì    容量：        500毫克
CO2結(jié)合力測試盒    shēng huà shì jì    容量：    RT    500克