產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
中國倉鼠肺細胞;V79復(fù)蘇 | 貼壁生長 | 上海 | 3-5天 |
細胞名稱 中國倉鼠肺細胞;V79復(fù)蘇
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 這株細胞源自一只雌性中國倉鼠的肺組織,原名V細胞株, 1958年Elkind將其改名為V79并用于研究培養(yǎng)中的哺乳動物細胞的X-放射線誘導(dǎo)的損傷及修復(fù)。 該細胞免疫球蛋白產(chǎn)物和EB病毒表達為陰性。 該細胞表達Fas抗原且對TNF和抗-Fas抗體敏感。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,20%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:3。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
*;肝素;肝磷脂 Heparin sodiuM salt;Hepsal;Lipohepin;LiqueMin;Lipohepinette;Longheparin;Monoparin;Panheprin;Pularin 9041/8/1
*(系統(tǒng)適應(yīng)用) NA
*標(biāo)準(zhǔn)品(冷凍運輸) NA
高氯酸(*)¤ PERCHLORIC ACID 7601-90-3
高氯酸銨(*) AMMONIUM PERCHLORATE 7790-98-9
高氯酸鋇(*) BARIUM PERCHLORATE TRIHYDRATE 10294-39-0
(*) Potassium perchlorate 7778-74-7
高氯酸鋰(*) Lithium perchlorate trihydrate 13453-78-6
一水高氯酸鈉 SODIUM PERCHLORATE MONOHYDRATE 7791/7/3
*(易制毒-3) Potassium permanganate 7722-64-7人干細胞因/肥大細胞生長因(SCF/MGF)免疫試劑盒 Human SCF/MGF ELISA kit
人干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1(IFITM1/CD225/IFI17)免疫試劑盒 Human IFITM1 ELISA kit
人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)免疫試劑盒 Human IP-10 ELISA Kit
人干擾素誘導(dǎo)T細胞趨化因(ITAC/CXCL11)免疫試劑盒 Human ITAC ELISA Kit
人干擾素活化基因205(Ifi205)免疫試劑盒 human interferon activated gene 205,Ifi205 ELISA Kit
人干擾素調(diào)節(jié)因8(IRF8)免疫試劑盒 Human IRF8 ELISA Kit
人干擾素調(diào)節(jié)因3(IRF3)免疫試劑盒 Human IRF3 ELISA Kit
人干擾素a-抗體(Anti-IFN-ab)免疫試劑盒 Human Anti-interferon antibody(Anti-IFN-ab)ELISA Kit