【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C8
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
產(chǎn)品名稱 | 中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克?。?;CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA培養(yǎng) |
貨期 | 3-5天 |
發(fā)貨地 | 上海 |
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA培養(yǎng)復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克?。?;CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA培養(yǎng)操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
甲亞胺-H一鈉鹽,水合 AZOMETHIN-H MONOSODIUM SALT HYDRATE 206752-32-1
甲氧甲基三苯基氯化鏻 (Methoxymethyl)triphenylphosphonium chloride 4009-98-7
鉀 PotassiuM 7440/9/7
假單胞菌分離瓊脂 NA
3-氨基苯甲腈;間氨基苯甲腈;間氰代苯胺;間氨基氰代苯 3-AMinobenzonitrile;M-AMinobenzonitrile;M-Cyanoaniline;M-AMinophenyl cyanide; 2237-30-1
間氨基苯甲酸 3-Aminobenzoic acid 1999/5/8
1,3-苯二胺;間苯二胺;1,3-二氨基苯 1,3-PhenylenediaMine;M-PhenylenediaMine;1,3-DiaMinobenzene;1,3-BenzenediaMine 108-45-2
間苯二胺鹽酸鹽 Benzene-1,3-diamine dihydrochloride 541-69-5
間碘苯腈 3-Iodobenzonitrile 69113-59-3人彈性蛋白(ELN)免疫試劑盒 Human Elastin,ELN ELISA Kit
人膽酸(Cholic acid)免疫試劑盒 Human Cholic acid ELISA Kit
人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)免疫試劑盒 Human cholecystokinin octapeptide,CCK-8 ELISA Kit
人膽囊收縮素/腸促*肽(CCK)免疫試劑盒 Human cholecystokinin,CCK ELISA Kit
人*轉(zhuǎn)運(yùn)體樣蛋白4(SLC44A4)免疫試劑盒 Human Choline transporter-like protein 4,SLC44A4 ELISA kit
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克?。?;CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA培養(yǎng)人*乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)免疫試劑盒 Human ChAT ELISA Kit
人*氧化代謝物 免疫試劑盒 Human Biopyrrin ELISA Kit
人*酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)免疫試劑盒 Human CETP ELISA Kit