【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21使用說明書
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系是于1961年由Macpherson IA、Stoker MGP建系,源自5只未辨性別的1天齡倉鼠腎;可作為轉化宿主;OIE組織將該細胞用于狂犬病的診斷。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1:3傳代;3-4天一次
傳代情況 PN4
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體 42-44
使用權限 A類
產品名稱 | 敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21使用說明書 |
貨期 | 3-5天 |
發貨地 | 上海 |
復蘇操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
硫酸-5-羥色胺肌酐(+4℃) 3-(2-AMINOETHYL)-5-HYDROXYINDOLE CREATININE SULFATE COMPLEX 971-74-4
硫酸氨基胍 Aminoguanidinium sulphate 1068-42-4
硫酸苯胺 Aniline sulfate 542-16-5
硫酸間苯二胺 1,3-Phenylenediamine sulfate 541-70-8
硫酸鋯 Zirconium sulfate tetrahydrate 7446-31-3
硫酸鎘 Cadmium sulfate octahydrate 7790-84-3
硫酸鉻鉀 Chromium potassium sulfate dodecahydrate 7788-99-0
硫酸鉻溶液 Chromic sulfate 10101-53-8
硫酸汞 MERCURY(II) SULFATE 7783-35-9
硫酸鈷銨 Ammonium cobalt(II) sulfate hexahydrate 13586-38-4人本周蛋白(BJP)免疫試劑盒 Human Bence-Jones protein,BJP ELISA Kit
人胞質動力蛋白(CD)免疫試劑盒 Human cytoplasmic dynein,CD ELISA kit
人胞外超氧化物歧化酶(SOD3)免疫試劑盒 Human Extracellular superoxide dismutase [Cu-Zn](SOD3)ELISA kit
人胞漿型磷脂酶A2-α(cPLA2-α)免疫試劑盒 Human cytosolic phospholipase A2-α,cPLA2-α ELISA Kit
人包蟲抗體IgG 免疫試劑盒 Human echinococcus antibody IgG ELISA Kit
人膀胱腫瘤抗原(BTA)免疫試劑盒 Human Bladder tumor antigen,BTA ELISA Kit
人膀胱癌抗原(UBC)免疫試劑盒 Human urinary bladder cancer antigen,UBC ELISA Kit
人伴侶蛋白10(CPN10)免疫試劑盒 Human chaperonin 10,CPN10 ELISA Kit