細胞名稱  豹貓肺成纖維樣細胞；LCL2培養(yǎng)
形態(tài)特性   成纖維細胞樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細胞系來源于一雌性豹貓的肺組織。2000年由*昆明細胞庫建立。 
培養(yǎng)條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)   20%NBS
傳代方法   1：2傳代；3-4天一次
傳代情況  P4
凍存條件   基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  熒光法（-）
STR   -
同工酶  
染色體  
使用權限  B類

復蘇操作要點： 
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。 
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。 
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。 
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。 
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
4,5-咪唑二羧酸    4,5-Imidazoledicarboxylic acid    570-22-9
米吐爾    4-Methylaminophenol sulfate    55-55-0
嘧啶;二氮三烯六環(huán);間(二)氮苯    PyriMidine;1,3-Diazine;Miazine;M-Diazine    289-95-2
蜜二糖    MELIBIOSE    585-99-9
D(+)-棉子糖;桉糖;蜜三糖;甜菜糖    D(+)-Raffinose;Gossypose;Melitose;Melitriose;1,6-(α-Galactopyranosyl)-α-D-glucopyranosyl-β-D-fructofuranoside;(α-Galactosyl)sucrose    17629-30-0
茉莉香精    Jasmine flavour    
木防己苦毒素（劇毒）    PICROTOXIN    124-87-8
木瓜酶    Papain    9001-73-4
木霉菌溶胞酶（+4`C）    NA    
木犀草素    Luteolin    491-70-3
木質素    LIGNIN, ALKALI    8068/5/1
木質桃紅    NA    
鉬    MolybdenuM    7439-98-7人β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)免疫試劑盒    Human β-glucuronidase,βGD ELISA Kit
人β葡萄糖苷酶(β-glucosidase)免疫試劑盒    Human β-glucosidase ELISA Kit
人β萘酚(β-naphthol)免疫試劑盒    Human Beta-naphthol ELISA Kit
人β內啡肽受體(β-EPR)免疫試劑盒    Human Beta-Endorphin receptor,β-EPR ELISA Kit
人β內啡肽(β-EP)免疫試劑盒    human Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit
人β-連環(huán)蛋白(CTNNB1/CTNNB/OK/SW-cl.35/PRO2286)免疫試劑盒    Human CTNNB1 ELISA kit
人β膠原交聯(lián)(bCTx)免疫試劑盒    Human beta-crosslaps,bCTx ELISA kit
人β-肌動蛋白(β-actin)免疫試劑盒    Human β-actin ELISA Kit
人β-黑色素細胞刺激素(β-MSH)免疫試劑盒    Human β-melanocyte stimulating hormone,β-MSH ELISA Kit