【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 狗肺成纖維樣細胞；DogL1培養
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一雄性家狗的肺組織。1990年由*昆明細胞庫建立。
培養條件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 15%NBS
傳代方法 1：2傳代；3-4天一次
傳代情況 P5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
| 產品名稱 | 狗肺成纖維樣細胞；DogL1培養 |
| 貨期 | 3－5天 |
| 發貨地 | 上海 |
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人C型凝集素結構域家族4成員E(CLEC4E)免疫試劑盒 human CLEC4E ELISA Kit
人C肽(C-Peptide)免疫試劑盒 Human C-Peptide ELISA Kit
人C多肽(CP)免疫試劑盒 Human C-Polypeptide,CP ELISA Kit
人CXC趨化因受體7(CXCR7)免疫試劑盒 Human CXCR7 ELISA Kit
人CXC趨化因受體4(CXCR4)免疫試劑盒 Human CXCR4 ELISA Kit
人CXC趨化因受體3(CXCR3)免疫試劑盒 Human CXCR3 ELISA Kit
人CXC趨化因配體16(CXCL16)免疫試劑盒 Human CXCL16 ELISA Kit
人c-sis 免疫試劑盒 Human c-sis ELISA Kit
人Corin 免疫試劑盒 Human Corin ELISA Kit
人COP9 結構光形態發生同源物亞基2(擬南芥)(COPS2)免疫試劑盒 Human COPS2 ELISA Kit三異丙醇胺環硼酸酯 Triisopropanolamine cyclic borate 101-00-8
三異丙基硅烷 Triisopropylsilane 6485-79-6
三正十二胺 TRIDODECYLAMINE 102-87-4
噻吩-2-磺酰氯 2-Thiophenesulfonyl chloride 16629-19-9
噻吩-2-甲醛 ; 1998/3/3
噻唑藍 Thiazolyl Blue 298-93-1
噻苯隆 ;賽苯隆 5-Phenylcarbamoylami,2,3-thiadiazole 51707-55-2
2-乙基-2-（羥甲基）-1，3-丙二醇 Trimethylol propane 77-99-6
