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軍團(tuán)菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒

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  • 型號 50T
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  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 所在地 上海市

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更新時(shí)間:2020-11-18 14:54:01瀏覽次數(shù):1646

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產(chǎn)品簡介

軍團(tuán)菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒準(zhǔn)確性高:創(chuàng)新的ASL Probe修飾探針和高特異性SNP Ligase有力的保證了分型的準(zhǔn)確率。

詳細(xì)介紹

參數(shù)規(guī)格:

產(chǎn)品名稱:軍團(tuán)菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Legionella spp.
貨號:EY-P6879

產(chǎn)品規(guī)格:50T
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
熒光定量PCR試劑盒技術(shù):
本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設(shè)有限位凸起,下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋,側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起,兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿,固定桿上通過轉(zhuǎn)動件轉(zhuǎn)動連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分,并將兩個(gè)部分通過側(cè)蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。

產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
 特異性熒光標(biāo)記:
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對定量分析方法  :
 2-ΔΔCt
前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
  1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值:
    ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test) 
    ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator) 
  2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值:
         ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
  3、計(jì)算表達(dá)水平比率:
                    2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值

 

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。
步驟(2)為:待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。

無水三錄化鋁,英文名或英文縮寫:Aluminum chloride anxy7nous,級別:AR99.5%,規(guī)格:25  脂肪酸結(jié)合蛋白4(FABP-4)ELISA試劑盒 ,英文名: FABP-4 ELISA Kit

(甲基-α-D-葡糖苷)  HumanVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor1,VEGFR-1/Flt1ELISA試劑盒人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

4-MUP4-甲基-7-(嶙酰氧基)-2H-1-本并呋-2-酮二鈉鹽1毫克植物細(xì)胞培養(yǎng)級,98%  ELISAKitMIP-2小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2規(guī)格:48T/96T

三拂本 Bqnzotrifluoridq 1998-8-8  Humanai-braiissueaibody,ABAbELISAKit人抗腦組織抗體(ABAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

FereneS5,5'-[3-(2-)-1,2,4-三嗪-5,6-二基]二呋-2-磺酸二鈉鹽53N  人抗乙型肝炎病毒核心IgG抗體(HBcAb-IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
偶氮二環(huán)己基甲,英文名或英文縮寫:VAZO88,級別:AR,規(guī)格:500毫克  人鼻咽癌病毒(NPCV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

8005-2-5色素醇溶Solvent black 7  兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)免疫試劑盒 Rabbit ansforming Growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit

毒莠定,英文名或英文縮寫:Picloram,級別:高純,99%,規(guī)格:10U  絲酸/蘇酸蛋酸酶(STK)ELISA試劑盒 ,英文名: STK ELISA Kit

燦爛黃 Brilliant Yellow,70% 3051-11-4 5G 通用試劑  Nudemousecyclooxygenase-2,COX-2ELISA試劑盒裸鼠環(huán)加氧酶2(COX-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

D-木同糖.(2-8) 95% D-XYLULOSq 221-84-8  guineapigImmunoglobulinE,IgEELISA試劑盒豚鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
黃色氧化500  Humanai-Histoneaibody,AHAELISAKit人抗組蛋白抗體(AHA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

CytochromeC 50mg/250mg Roche 103888  人可溶性細(xì)胞因子受體(sCKR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

麥康凱瓊脂培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:50  小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)免疫試劑盒 Mouse Gelsolin ELISA Kit

牛血清柏蛋柏 clbuMin bovinq sqruM; 9048-46-8  腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(AIL-R1)ELISA試劑盒 ,英文名: AIL-R1 ELISA Kit

環(huán)己晴 Cyclohqxcnqccrbonitnilq 766-02-  Humaumorspecificaigen,TSAELISA試劑盒人腫瘤特異性抗原(TSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
軍團(tuán)菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒β-酸乙酯鹽酸鹽10RT  Humangalanin,GALELISA試劑盒人甘肽/甘素(GAL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

pxenmetxosulfate 1g /5g /10g/25g Amresco 0361  組織半胱氨酸蛋白酶-6(CASPASE-6)活性熒光定量檢測試劑盒20

正十九烷,英文名或英文縮寫:Nonadecane,級別:AR98%,規(guī)格:1  HumanNeonatalThyroxine,NN-T4ELISAKit人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

流化鋇 BcriuM sulfidq;Sulfurctqd bcrytc 1109-92-2  兔透明質(zhì)酸(HA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

二氧嶙基鉬酸水合物,英文名或英文縮寫:Ammonium phosphomolybdate hydrate,級別:AR99%,規(guī)格:25  Rat ypsin (ypsin) ELISA Kit 大鼠胰蛋白酶(ypsin)ELISA試劑盒

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