【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人正常眼瞼上皮細胞;HNEEC/HL-014操作步驟
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
細胞名稱 | 人正常眼瞼上皮細胞;HNEEC/HL-014操作步驟 |
生長特性 | 貼壁生長 |
價格 | 來電可享受優惠 |
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
操作步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢:
1、細胞株種類齊全,包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等
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Rb/P105 RB 成視網膜細胞瘤基因抗體
phospho-Rb/p105-Rb(Ser780) 磷酸化成視網膜細胞瘤抑癌蛋白抗體
phospho-FXYD1 (Ser83) 磷酸化磷酸神經膜抗體
RRAD RRAD抗體
phospho-FXYD1 (Ser88) 磷酸化磷酸神經膜抗體
Rsk2/MAPKAP Kinase 1b 核糖體S6激酶RSK2抗體
Phospho-RSK2 (Ser227) 磷酸化核糖體S6激酶RSK2抗體
Phospho-RSK2(Tyr529) 磷酸化核糖體S6激酶RSK2抗體
RSK3/Ribosomal S6 kinase 3 核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體
Phospho-RSK3 (Thr353/356) 磷酸化核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體
Phospho-RSK3 (Thr356/Ser360) 磷酸化核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體
RSV 呼吸道合胞病毒抗體
RXR Alpha/RXRA/Retinoid X receptor 核受體RXRα抗體
RXR gamma 維甲酸受體G抗體
RXR beta/RXRB 核受體RXRβ抗體
RUNX1/AML1 急性髓細胞白血病1蛋白抗體
phospho-RUNX1(Ser266) 磷酸化急性髓細胞白血病1蛋白抗體
Runx3 Runx3抗體
SDH/S6PDH 6-磷酸*脫氫酶抗體
SDH/Sorbitol Dehydrogenase *脫氫酶抗體
SDHA 琥珀酸脫氫酶復合體亞基A抗體
SDHD 線粒體琥珀酸脫氫酶D抗體
S100B S100B蛋白抗體
S-100/S100A1 S100A1抗體
S100A13 S100A13抗體
S100A14 S100A14/15抗體