【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人胚肺二倍體細胞;HEL-1操作步驟
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來自一男性胎兒的正常肺組織,1986年由*昆明細胞庫建立。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P5
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞名稱 | 人胚肺二倍體細胞;HEL-1操作步驟 |
生長特性 | 貼壁生長 |
價格 | 來電可享受優惠 |
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
操作步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢:
1、細胞株種類齊全,包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等
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輸入蛋白13(IPO13)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
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白介素22受體(IL2R)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
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乙醇脫氫酶3(ADH3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
乙醇脫氫酶4(ADH4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
乙醇脫氫酶5(ADH5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
乙醇脫氫酶6(ADH6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
CD148抗體
PTPRA *磷酸酶α抗體
PTP1B 蛋白*磷酸酶-1B
MOSP/PTPMT1 線粒體蛋白*磷酸酶1抗體
Parvalbumin 細小清蛋白抗體
Securin/PTTG 垂體腫瘤轉化基因抗體
PXR 孤兒核受體PAR1抗體
PITX3 炎癥因子3抗體(穿透素)
PYGL 肝糖原磷酸化酶抗體
PYGM 肌肉糖原磷酸化酶抗體
Peptide YY/PYY 酪酪肽抗體
Rad17/RFC 細胞周期檢控Rad17蛋白抗體(復制因子C)
Phospho-Rad17 (Ser645) 磷酸化細胞周期檢控Rad17蛋白抗體
Rab24 ras基因相關蛋白Rab24抗體
phospho-Rab24(Ser95) 磷酸化ras基因相關蛋白Rab24抗體
phospho-Rab24(Tyr17) 磷酸化ras基因相關蛋白Rab24抗體
Rad51 Rad51抗體
Rad52 Rad52抗體
phospho-RAD51(Tyr315) 磷酸化Rad51抗體
RAD51C 癌和卵巢癌易感基因RAD51C抗體
RAE1 mRNA結合蛋白抗體
Radixin 根蛋白抗體
Raptor mTOR相關調控蛋白抗體
Phospho-Raptor (Ser792) 磷酸化mTOR相關調控蛋白抗體
RAP1A 抗Rap1A抗體
ALDH1 乙醛脫氫酶1型抗體
ALDH2/ALDHI 乙醛脫氫酶2抗體
RALDH2 *脫氫酶2型抗體
ALDH1L1 乙醛脫氫酶1蛋白家族L1抗體
phospho-c-Raf(Ser338/Tyr340) 磷酸化原癌基因c-Raf抗體
phospho-c-Raf (Ser289) 磷酸化原癌基因c-Raf抗體
phospho-c-Raf(Ser259) 磷酸化原癌基因