1.產品名稱：大鼠結腸平滑肌細胞實驗方法

2.組織來源：結腸組織

3.產品規格：5×10^5cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介：

大鼠結腸平滑肌細胞分離自結腸組織；結腸在右髂窩內續于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸、橫結腸、降結腸和乙狀結腸4部分，大部分固定于腹后壁，結腸的排列酷似英文字母“M”，將小腸包圍在內。結腸橫切面由內到外依次為：黏膜（上皮層、固有層、黏膜肌層），黏膜下層（疏松結締組織），肌層（內環形、外縱行兩層平滑肌），外膜（纖維膜或漿膜）。結腸平滑肌細胞主要分布于黏膜肌層和肌層的內環形、外縱行平滑肌；結腸運動少而緩慢，對刺激的反應也較遲緩。結腸平滑肌在食物消化與吸收、腸道運動和物質分泌、誘發全身炎癥反應以及細胞內信號轉導途徑等研究中起著重要的作用。結腸平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。結腸平滑肌運動活性受到神經遞質、胃腸激素和藥物等因素的調節。隨著現代胃腸動力學研究的進展，對胃腸運動的研究已從器官、組織水平發展到細胞、分子水平，要求在胃腸道單個平滑肌細胞標本上來完成各種電生理、藥理和分子生物學等實驗。體外培養細胞，由于影響因素單一，是研究細胞功能以及相應的細胞信號轉導機制的基礎。

本公司的大鼠結腸平滑肌細胞采用*-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經alpha-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

5.培養基信息：

DMEM[H]、FBS、平滑肌細胞生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

優勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
2、*，專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態圖片，五天內有問題公司負責重發，超過五天時限至一個月內重發細胞收半價，超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠，完善、穩定的實驗體系，優秀的科研隊伍，*的實驗設備、準確可靠的實驗結果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

蛋白*磷酸酶受體K(PTPRK)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17490 CLIA Kit for Myostatin (MSTN) 96T Rattus norvegicus (Rat)
蛋白*磷酸酶受體B(PTPRB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17491 CLIA Kit for Interleukin 21 (IL21) 96T Homo sapiens (Human)
三葉因子1(TFF1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17492 CLIA Kit for Interleukin 21 (IL21) 96T Mus musculus (Mouse)
雌激素受體α(ERα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17493 CLIA Kit for Interleukin 21 (IL21) 96T Rattus norvegicus (Rat)
膽囊收縮素B受體(CCKBR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17494 CLIA Kit for Interleukin 28A (IL28A) 96T Homo sapiens (Human)
催產素(OT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17495 CLIA Kit for Interleukin 28A (IL28A) 96T Mus musculus (Mouse)
凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17496 CLIA Kit for Interleukin 25 (IL25) 96T Homo sapiens (Human)
V-Myb髓細胞組織增生病毒癌基因同源物(MYB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17497 CLIA Kit for Interleukin 25 (IL25) 96T Mus musculus (Mouse)
70kDa熱休克蛋白4(HSPA4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17498 CLIA Kit for Interleukin 25 (IL25) 96T Rattus norvegicus (Rat)
泛素連接酶E3A(UBE3A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17499 CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 2 (GDF2) 96T Homo sapiens (Human)
Anti-SP    IFABP(Intestinal Fatty acid binding protein)  小腸型脂肪酸結合蛋白抗原 X57752  0.1ml
Anti-SP-A    IFITM1 (interferon induced transmembrane protein 1)  干擾素誘導跨膜蛋白1抗原 X57753  0.2ml
Anti-SPAG5/map126   human IFN- Alpha (Interferon Alpha )  干擾素-α抗原（人） X57754  0.1ml
Anti-SPARC    IFNGR1/CD119 peptide  干擾素-gamma受體1抗原 X57755  0.2ml
Anti-SP-B    IGFBP-2 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 2)  胰島素樣生長因子結合蛋白-2（多肽） X57756  0.1ml
Anti-Spectrin-α    IGFBP-3 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 3)C-term  胰島素樣生長因子結合蛋白-3抗原 X57757  0.2ml
Anti-Spindlin 1/SPIN-2   IGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3)  胰島素樣生長因子2 mRNA 結合蛋白3抗原 X57758  0.2ml
anti-SPY    IKB Beta (Inhibitor of KB)  KB抑制蛋白β(多肽) X57759  0.1ml
Anti-SRC    IKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha)  KB抑制蛋白α抗原 X57760  0.2ml
Anti-SRG2    IL-12(Interleukin-12)  白介素12抗原（白細胞介素-12） X57761  0.2ml
Anti-SSA/RO    IL-12(Interleukin-12)human peptide  白介素12抗原(人) X57762  0.1ml
Anti-SSB/La   IL-12R Beta2/IL12RB2 peptide  白細胞介素-12受體β2抗原 X57763  0.2ml
Anti-SSTR1    IL-13(Interleukin-13)  白介素13抗原 X57764  0.2ml
Anti-SSTR2    IL-14/Taxilin alpha  白介素14抗原 X57765  0.2ml
Anti-SSTR5    IL-15(Interleukin-15)  白細胞介素-15抗原 X57766  0.2ml
Anti-STAT2    IL-16(Interleukin-16)  白介素