【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

1.產(chǎn)品名稱：大鼠子宮頸上皮細胞操作步驟

2.組織來源：子宮組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

大鼠子宮頸上皮細胞分離自子宮頸組織；子宮頸位于子宮下部，近似圓錐體，上端與子宮體相連，下端深入。頂端的穹隆又將子宮頸分為兩部分：宮頸突入的部分稱宮頸部，在穹隆以上的部分稱宮頸上部。宮頸的*為前后略扁的長梭性管腔，其上端通過宮頸內(nèi)口與子宮腔相連，其下端通過宮頸外口開口于。內(nèi)外口之間即宮頸管。宮頸的大小與宮體比例隨年齡及內(nèi)分泌狀態(tài)等而變化；宮頸壁由黏膜、肌層和外膜組成。子宮頸可有多種疾病，包括胚胎發(fā)育異常、炎癥、瘤樣病變、良性腫瘤、惡性腫瘤、損傷、宮頸性、輔助生育技術(shù)、宮頸與性、宮頸等許多問題，體外培養(yǎng)的子宮頸上皮細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

本公司的大鼠子宮頸上皮細胞采用先膠原酶消化、后組織貼塊法，結(jié)合上皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經(jīng)Cytokeratin-19/PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

5.培養(yǎng)基信息：

M199、FBS、上皮細胞生長添加劑、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內(nèi)膜細胞等
2、*，專業(yè)的細胞培養(yǎng)技術(shù)指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問題公司負責重發(fā)，超過五天時限至一個月內(nèi)重發(fā)細胞收半價，超過一個月重發(fā)全額收費。
5、經(jīng)濟、實惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實驗體系，優(yōu)秀的科研隊伍，*的實驗設(shè)備、準確可靠的實驗結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
驗法) M17428 CLIA Kit for Interferon Alpha 16 (IFNa16) 96T Homo sapiens (Human)
己糖激酶1(HK1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) M17429 CLIA Kit for Interferon Alpha 14 (IFNa14) 96T Homo sapiens (Human)
己糖激酶1(HK1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) M17430 CLIA Kit for Interferon Alpha 13 (IFNa13) 96T Homo sapiens (Human)
己糖激酶1(HK1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) M17431 CLIA Kit for Interferon Alpha 13 (IFNa13) 96T Mus musculus (Mouse)
Ⅳ型膠原(COL4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) M17432 CLIA Kit for Interferon Alpha 13 (IFNa13) 96T Rattus norvegicus (Rat)
中期因子(MK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) M17433 CLIA Kit for Interferon Alpha 10 (IFNa10) 96T Homo sapiens (Human)
胰島素樣生長因子1(IGF1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) M17434 CLIA Kit for Interferon Alpha 10 (IFNa10) 96T Mus musculus (Mouse)
同型半*(HA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) M17435 CLIA Kit for Interferon Alpha 8 (IFNa8) 96T Homo sapiens (Human)
細胞間粘附分子1(ICAM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) M17436 CLIA Kit for Interferon Alpha 7 (IFNa7) 96T Homo sapiens (Human)
*S轉(zhuǎn)移酶α1(GSTα1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) M17437 CLIA Kit for Interferon Alpha 6 (IFNa6) 96T Homo sapiens (Human)
*S轉(zhuǎn)移酶α1(GSTα1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) M17438 CLIA Kit for Interferon Alpha 5 (IFNa5) 96T Homo sapiens (Human)
*S轉(zhuǎn)移酶α5(GSTα5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) M17439 CLIA Kit for Interferon Alpha 5 (IFNa5) 96T Mus musculus (Mouse)
抗原 X57660  0.1ml
anti-Pdx1   CXCR3/CD183 peptide  細胞表面趨化因子受體3抗原 X57661  0.1ml
Anti-PEDF    GATA-3(GATA binding factor 3)  GATA結(jié)合蛋白3抗原 X57662  0.1ml
Anti-PEG10    GATA-4(GATA binding factor 4)  GATA結(jié)合蛋白4抗原 X57663  1ml
Anti-PEPT1    Gax(growth arrest-specific homeobox)  生長終止特異性同源盒基因抗原 X57664  0.1ml
Anti-PEPT2    GDF8/MSTN(growth differntiation factor 8)  生長分化因子8抗原 X57665  0.1ml
Anti-P-fscn1    GDNF (Glial cell line-derived neurotrphic factor)  膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗原 X57666  0.1ml
Anti-P-GP   Gelsolin  凝溶膠蛋白抗原 X57667  0.1ml
Anti-PGRN    GFP  綠色熒光蛋白 X57668  0.1ml
Anti-PI3K/P85 alpha   GFP  綠色熒光蛋白 X57669  0.1ml
Anti-PIBF   GITR (glucocorticoidinduced tumor necrosis factor receptor)  糖皮質(zhì)激素誘導腫瘤壞死因子受體抗原 X57670  0.2ml
Anti-PIWIL1   GLI1(GLI-Kruppel family member 1)  下游轉(zhuǎn)錄因子Gli1蛋白抗原 X57671  0.1ml
Anti-PKA   GLP-1/KG-31(Glucagon-like peptide-1) peptide  胰高血糖素樣肽-1（多肽） X57672  0.1ml
Anti-PKB/AKT-1   GLP-1 peptide  胰高血糖素樣肽-1（多肽） X57673  0.1ml
Anti-PKC   GLP-1R peptide  胰高血糖素樣肽-1受體多肽 X57674  0.1ml
Anti-PLAU/uPA    GLUT3(Glucose transporter 3)  葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白3抗原 X57675  0.1ml
Anti-PLGF     GM-CSF(Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factors)  粒細胞-巨噬細胞克