1.產品名稱：大鼠胚胎成纖維細胞實驗方法

2.組織來源：胚胎組織

3.產品規格：5×10^5cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介：

大鼠胚胎成纖維細胞分離自胚胎；成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的胚胎成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁*，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細胞常用作ES細胞培養常用的飼養層細胞，能產生抑制ES細胞自主分化和促進ES細胞增殖的因子，故能有效地促進ES細胞的增殖并維持其未分化特性和多潛能性，且分泌效果優于外源添加的一些因子，而且可以為ES細胞的培養提供類似于體內的微環境，故在研究哺乳動物ES細胞中得到廣泛使用。

本公司的大鼠胚胎成纖維細胞采用*-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

5.培養基信息：

DMEM[H]、FBS、成纖維細胞生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

優勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
2、*，專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態圖片，五天內有問題公司負責重發，超過五天時限至一個月內重發細胞收半價，超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠，完善、穩定的實驗體系，優秀的科研隊伍，*的實驗設備、準確可靠的實驗結果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
Receptor Accessory Protein (IL1RAP) 96T Y17463 Homo sapiens (Human)
白介素1受體輔助蛋白(IL1RAP)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 1 Receptor Accessory Protein (IL1RAP) 96T Y17464 Mus musculus (Mouse)
白介素1受體輔助蛋白(IL1RAP)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 1 Receptor Accessory Protein (IL1RAP) 96T Y17465 Rattus norvegicus (Rat)
肝素結合性表皮生長因子(HBEGF)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Heparin Binding Epidermal Growth Factor Like Growth Factor (HBEGF) 96T Y17466 Mus musculus (Mouse)
肝素結合性表皮生長因子(HBEGF)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Heparin Binding Epidermal Growth Factor Like Growth Factor (HBEGF) 96T Y17467 Rattus norvegicus (Rat)
肺部激活調節趨化因子(PARC)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Pulmonary Activation Regulated Chemokine (PARC) 96T Y17468 Homo sapiens (Human)
絲切蛋白1(CFL1)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Cofilin 1, Non Muscle (CFL1) 96T Y17469 Homo sapiens (Human)
絲切蛋白1(CFL1)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Cofilin 1, Non Muscle (CFL1) 96T Y17470 Mus musculus (Mouse)
絲切蛋白1(CFL1)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Cofilin 1, Non Muscle (CFL1) 96T Y17471 Rattus norvegicus (Rat)
淋巴毒素β(LTβ)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Lymphotoxin Beta (LTb) 96T Y17472 Homo sapiens (Human)
淋巴毒素β(LTβ)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Lymphotoxin Beta (LTb) 96T Y17473 Mus musculus (Mouse)
淋巴毒素β(LTβ)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)
IgG   0.2ml
Anti-Os05g/0477200 protein /FITC  熒光素標記抗水稻白葉枯病菌Os05g0477200蛋白抗體IgG   0.2ml
Anti-OTR/FITC  熒光素標記*受體抗體IgG   0.2ml
Anti-OVA/FITC  熒光素標記兔抗雞卵白蛋白/卵清蛋白抗體IgG   0.2ml
Anti-ox-LDL/FITC  熒光素標記抗氧化低密度脂蛋白抗體IgG   0.2ml
Anti-OXR /FITC  熒光素標記整合素樣金屬蛋白酶與*1型-7抗體IgG   0.2ml
Anti-Oxytetracycline/FITC  熒光素標記*抗體IgG   0.2ml
Anti-P2P-R/RBBP6 /FITC  熒光素標記增殖潛能相關蛋白抗體IgG   0.2ml
Anti-P2Y1 receptor/FITC  熒光素標記P2Y1受體抗體IgG   0.2ml
Anti-P2Y4 receptor/P2ry4 /FITC  熒光素標記P2Y4受體抗體IgG   0.2ml
Anti-P14ARF/FITC  熒光素標記抑癌基因p14抗體IgG   0.2ml
Anti-P16/FITC  熒光素標記兔抗抑癌基因p16抗體IgG   0.2ml
Anti-P19ARF/FITC  熒光素標記p19ARF抑癌基因抗體IgG   0.2ml
Anti-P21/WAF1/CIP1 /FITC  熒光素標記p21抗體IgG   0.2ml
Anti-P27/kip1 /FITC  熒光素標記P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑IgG   0.2ml
Anti-P27/kip1/Cy3  熒光素Cy3標記P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑IgG   0.2ml
Anti-P38 MAPK/FITC  熒光素標記絲裂原活化蛋白激酶p38抗體IgG   0.2ml
Anti-P38 MAPK/RBITC  紅色熒光素羅丹明(RBITC)標記絲裂原活化蛋白激酶p38抗體IgG   0.2ml
Anti-P-p38 ERK/MAPK14 /FITC  熒光素標記磷酸化-絲裂原活化蛋白激酶p38抗體IgG   0.2ml
Anti-MAPKAP Kinase 2/FITC  熒光素標記絲裂原活