1.產(chǎn)品名稱:小鼠肺大動脈平滑肌細胞實驗方法
2.組織來源:肺動脈組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介:
小鼠肺大動脈平滑肌細胞分離自肺大動脈組織;肺大動脈亦稱肺動脈干。在呼吸空氣的脊椎動物中,把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動脈。肺大動脈起于右心室,在主動脈之前向左上后方斜行,在主動脈弓下方分為左、右肺動脈,經(jīng)肺門入肺。肺動脈干位于心包內(nèi),為一粗短的動脈干。起自右心室,在升主動脈前方向左后上方斜行,至主動脈弓下方分為左、右肺動脈。左肺動脈較短,在左主支氣管前方橫行,分二支進入左肺上、下葉。右肺動脈較長而粗,經(jīng)升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行,至右肺門處分為三支進入右肺上、中、下葉。肺大動脈平滑肌細胞是肺血管的重要結(jié)構(gòu)細胞之一,在調(diào)控肺血管的收縮和舒張功能中有重要作用。肺大動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。肺大動脈平滑肌細胞的異常是肺動脈高壓發(fā)生發(fā)展的重要病理學(xué)特征,其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的關(guān)鍵。研究表明,急性和慢性缺氧均可導(dǎo)致肺動脈高壓,即缺氧性肺動脈高壓,推斷缺氧可能是通過促進肺大動脈平滑肌細胞的增殖而參與缺氧性肺動脈高壓的發(fā)生發(fā)展。肺大動脈平滑肌細胞主要功能:①細胞表面表達介質(zhì)(ICAM-1和VCAM-1)參與血管壁炎癥反應(yīng);②是多數(shù)重要動脈疾病的靶細胞。肺大動脈平滑肌細胞與主要病生理變化:①平滑肌增生易致肺動脈高壓;②先天性肺動脈狹窄;③肺動脈栓塞。
本公司的小鼠肺大動脈平滑肌細胞采用*-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶;細胞經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息:
DMEM[H]、FBS、平滑肌細胞生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
細胞名稱 | 小鼠肺大動脈平滑肌細胞實驗方法 |
規(guī)格 | 5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
價格 | 來電可享受優(yōu)惠 |
優(yōu)勢:
1、細胞株種類齊全,包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內(nèi)膜細胞等
2、*,專業(yè)的細胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細胞株,免費復(fù)蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片,三天回傳細胞生長狀態(tài)圖片,五天內(nèi)有問題公司負責(zé)重發(fā),超過五天時限至一個月內(nèi)重發(fā)細胞收半價,超過一個月重發(fā)全額收費。
5、經(jīng)濟、實惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實驗體系,優(yōu)秀的科研隊伍,*的實驗設(shè)備、準確可靠的實驗結(jié)果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
(HDL) 96T Y17128 Homo sapiens (Human)
α2-巨球蛋白(α2M)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Alpha-2-Macroglobulin (a2M) 96T Y17129 Homo sapiens (Human)
β-乳球蛋白(βLg)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Beta-Lactoglobulin (bLg) 96T Y17130 Bos taurus; Bovine (Cattle)
白蛋白(ALB)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Albumin (ALB) 96T Y17131 Homo sapiens (Human)
白蛋白(ALB)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Albumin (ALB) 96T Y17132 Mus musculus (Mouse)
白蛋白(ALB)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Albumin (ALB) 96T Y17133 Rattus norvegicus (Rat)
甘丙肽(GAL)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Galanin (GAL) 96T Y17134 Homo sapiens (Human)
甘丙肽(GAL)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Galanin (GAL) 96T Y17135 Mus musculus (Mouse)
甘丙肽(GAL)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Galanin (GAL) 96T Y17136 Rattus norvegicus (Rat)
低密度脂蛋白(LDL)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Low Density Lipoprotein (LDL) 96T Y17137 Homo sapiens (Human)
抗利尿激素(ADH)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Antidiuretic Hormone (ADH) 96T Y17138 Homo sapiens (Human)
抗利尿激素(ADH)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Antidiuretic Hormone (ADH) 96T Y17139 Mus musculus (Mouse)
*(LZM)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Lysozyme (LZM) 96T Y17140 Chicken (Gallus)
透明質(zhì)酸酶(HAase)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法
Anti-IL-28B/IL-28C/FITC 熒光素標(biāo)記白細胞介素28B抗體IgG 0.2ml
Anti-IL-29/IFNL1/FITC 熒光素標(biāo)記白細胞介素29抗體IgG 0.2ml
Anti-IL-31/FITC 熒光素標(biāo)記白細胞介素31抗體IgG 0.2ml
Anti-IL-31RA/CRL3/FITC 熒光素標(biāo)記白介素31受體a抗體IgG 0.2ml
Anti-IL-32/NK4/FITC 熒光素標(biāo)記白介素32抗體IgG 0.2ml
Anti-IL-33/NFHEV/FITC 熒光素標(biāo)記白介素33抗體IgG 0.2ml
Anti-IL-33/FITC 熒光素標(biāo)記白介素33抗體IgG 0.2ml
Anti-ILK-1/FITC 熒光素標(biāo)記整合素連接激酶-1抗體IgG 0.2ml
Anti-ILT2/CD85j/FITC 熒光素標(biāo)記細胞表面免疫球蛋白樣轉(zhuǎn)錄因子2抗體IgG 0.2ml
Anti-ILTV/FITC 熒光素標(biāo)記抗雞傳染性喉氣管炎病毒抗體IgG 0.2ml
Anti-IMP3/FITC 熒光素標(biāo)記胰島素樣生長因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白3抗體IgG 0.2ml
Anti-ING1/p33/FITC 熒光素標(biāo)記生長抑制因子基因1抗體IgG 0.2ml
Anti-Inhibin Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記抑制素α抗體IgG 0.2ml
Anti-Inhibin BetaA/FITC 熒光素標(biāo)記抑制素βA抗體IgG 0.2ml
Anti-Inhibin Beta B /FITC 熒光素標(biāo)記抑制素βB抗體IgG 0.2ml
Anti-Inhibin Beta C /FITC 熒光素標(biāo)記抑制素βC抗體IgG 0.2ml
Anti-Inhibin Alpha/Biotin *化抑制素α抗體IgG 0.2ml
Anti-Insulin/FITC 熒光素標(biāo)記標(biāo)記胰島素抗體IgG 0.2ml
Anti-Insulin/FITC 熒光素標(biāo)記胰島素抗體IgG 0.2ml
Anti-Insulin(1-51 protein)/FITC 熒光素標(biāo)記胰島素1-51蛋白抗體IgG 0.2ml
Anti-Integrin alpha 1/CD49a/FITC 熒光素標(biāo)記整