1.產(chǎn)品名稱：小鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞實驗方法
2.組織來源：心臟組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡介：
小鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自心臟組織；心臟是脊椎動物身體中zui重要的一個器官，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構(gòu)成，左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等），使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞，它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用，在心臟血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學(xué)意義。近年來大量研究表明，心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能和病理改變直接影響心肌細(xì)胞功能，也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位，其作為體外研究的細(xì)胞模型在心肌缺血-再灌注發(fā)病機制和細(xì)胞間旁分泌細(xì)胞生長因子研究中起著重要作用。
本公司的小鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞采用膠原酶-*混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、zui后通過內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶；細(xì)胞經(jīng)CD31/vWF免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息：
M199、FBS、內(nèi)皮細(xì)胞生長添加劑、Heparin、Ascorbic Acid、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
| 細(xì)胞名稱 | 小鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞實驗方法 |
| 規(guī)格 | 5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
| 價格 | 來電可享受優(yōu)惠 |
優(yōu)勢：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細(xì)胞株，免費復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過五天時限至一個月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價，超過一個月重發(fā)全額收費。
5、經(jīng)濟、實惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實驗體系，優(yōu)秀的科研隊伍，*的實驗設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
兔轉(zhuǎn)化生長因子β2
兔一氧化氮合成酶
大鼠孕酮受體
人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子
小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶
植物*
植物*
小鼠血管緊張素Ⅱ
大鼠血管緊張素Ⅱ轉(zhuǎn)化酶
兔內(nèi)皮型一氧化氮合成酶
人神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1
植物*2
人神經(jīng)保護因子
小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子/雙調(diào)蛋白
兔*型纖溶酶原激活物受體
大鼠血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶
兔*型纖溶酶原激活物
植物*3
小鼠活化素A
人可溶性腫瘤壞死因子α受體
大鼠*釋放激素受體
大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶
兔超敏C反應(yīng)蛋白
植物*
小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子
人可溶性細(xì)胞因子受體
人可溶性凋亡相關(guān)因子配體
植物*6
兔基質(zhì)金屬蛋白酶1
小鼠骨成型蛋白2
大鼠熱休克蛋白47
人細(xì)胞凋亡抑制因子
小鼠骨成型蛋白4
植物25羥基*3
兔8-異構(gòu)前列腺素
大鼠內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素
大鼠檸檬酸合酶
兔子血小板因子4
autoantibody) ELISA Kit 小鼠補體1抑制物抗體 48T
PABA(Mouse para-aminobenzoic acid) ELISA Kit 小鼠對氨基苯甲酸 48T
hs-CRP(Mouse high sensitivity C-Reactive Protein) ELISA Kit 小鼠超敏C反應(yīng)蛋白 48T
Beta2-GP1 IgA/G/M(Mouse Beta2-glycoprotein 1 antibody IgA/G/M) ELISA Kit 小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M 48T
LAT(Mouse Linker for activation of T cell) ELISA Kit 小鼠T細(xì)胞活化連接蛋白 48T
EMAb(Mouse Endometrium Antibody) ELISA Kit 小鼠抗子宮內(nèi)膜抗體 48T
LDL-IC(Mouse LDL-IC) ELISA Kit 小鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物 48T
UU-Ab(Mouse Ureaplasma urealyticum antibody) ELISA Kit 小鼠解脲脲原體抗體 48T
GFAP(Mouse glial fibrillary acidic protein) ELISA Kit 小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白 48T
pANCA(Mouse Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody) ELISA Kit 小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體 48T
PI Ab-IgG/IgM(Mouse phosphatidylinositol antibody IgG/IgM) ELISA Kit 小鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM 48T
15-LO/LOX(Mouse 15-lipoxygenase) ELISA Kit 小鼠15脂加氧酶 48T
IFN- Beta/IFNB(Mouse Interferon Beta) ELISA Kit 小鼠β干擾素 48T
Tn- I (Mouse Troponin I ) ELISA Kit 小鼠肌鈣蛋白Ⅰ 48T
SAA(Mouse Serum amyloid A)ELISA Kit 小鼠血清淀粉樣蛋白A 48T
ACA(Mouse anti-centrol and centrosome antibody)ELISA Kit 小鼠抗中性粒/中心體抗體 48T
