1.產品名稱：兔主動脈平滑肌細胞實驗方法

2.組織來源：主動脈組織

3.產品規格：5×10^5cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介：

兔主動脈平滑肌細胞分離自主動脈組織；主動脈是體循環的動脈主干。其運行路徑為：升主動脈起于左心室，至右側第2胸肋關節高度移行為主動脈弓，弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動脈；在第12胸椎體高度穿膈的主動脈裂孔移行為腹主動脈，以上為胸主動脈，至第4腰椎體下緣分為左、右髂總動脈；髂總動脈在骶髂關節高度分為髂內、外動脈。主動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。主動脈平滑肌細胞在心血管疾病發生、發展中具有重要作用，以主動脈平滑肌細胞為實驗研究對象，探討心血管疾病相關發病機制是目前研究的熱點；體外培養的主動脈平滑肌細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

本公司的兔主動脈平滑肌細胞采用*-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經alpha-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

5.培養基信息：

DMEM[H]、FBS、平滑肌細胞生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

優勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
2、*，專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態圖片，五天內有問題公司負責重發，超過五天時限至一個月內重發細胞收半價，超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠，完善、穩定的實驗體系，優秀的科研隊伍，*的實驗設備、準確可靠的實驗結果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
膠體金標記的羊抗人IgG IRS-1
FITC標記的兔抗人IgG AQP3(aquaporin 3)
辣根過氧化物酶標記的兔抗馬IgM IRS-2
Alexa Fluor 488標記的羊抗人IgG AQP1(Aquaporin1)
Alexa Fluor 647標記的小鼠抗人IgG IRS-3
PE標記的鼠抗人IgG單克隆抗體 IRS-4
辣根過氧化物酶標記兔抗人IgA IRS P53 (Insulin receptor substrate P53)(多肽)
*標記的鼠抗人IgG單克隆抗體 PGE2 peptide
*標記的兔抗人IgG Integrin Beta chain (ITG- Beta3/ITGB3)
*標記的小鼠抗人IgG AQP9(aquaporin Protein-9)
*標記的兔抗人分泌型IgA Leptin
*標記的羊抗人IgM Leptin receptor(long)
Alexa Fluor 488標記的驢抗人IgG phospho-AR/androgen receptor( p-Ser580)peptide
PE-CY5標記的兔抗人IgG MAPK-1/2
PE標記的小鼠抗人IgG MAPKK2
Alexa Fluor 647標記的兔抗人IgG M2-PK ( pyruvate Kinase M2)
*標記的兔抗長爪沙鼠IgG M2-PK ( pyruvate Kinase M2 )
PE-Cy5.5標記的兔抗小鼠IgG-Fc p-Arhgef2/GEF-H1(Rho guanine nucleotide exchange factor 2,pSer810)
PE-Cy7標記的兔抗小鼠IgG-Fc Melan-A/MART-1
PE-Cy3標記的兔抗小鼠IgG-Fc ARIP2a(Activin receptor 2A)
PE-CY5標記的兔抗小鼠IgG-Fc Beta-arrestin 1/2(beta-arrestin 1/2)
*標記的兔抗小鼠k鏈 ARIP2B(Activin receptor 2B)
Alexa Fluor 647標記的兔抗猴IgM MTR-1A (Melatonin receptor-1A)
PE標記的兔抗小鼠k鏈 MTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells)又稱：MYC
PE-CY5標記的兔抗小鼠k鏈 N-coR1 (Nuclear receptor co-repressor 1)
 48T
PPAR- Alpha(Human peroxisome proliferators activator receptors alpha) ELISA Kit  人過氧化物酶體增殖物激活受體α   48T
Apo-E(Human Apolipoprotein E) ELISA Kit  人載脂蛋白E   48T
OGP(Human Osteogenic Growth Peptide) ELISA Kit  人成骨生長肽   48T
ODF(Human osteoclast differentiation factor) ELISA Kit  人破骨細胞分化因子   48T
OH-PYD(Human Hydroxy-Pyridinium crosslinks) ELISA Kit  人羥基膠原吡啶交聯   48T
DPD(Human Deoxypyridinoline crosslinks) ELISA Kit  人脫氧膠原吡啶交聯   48T
PYD(Human Pyridinoline crosslinks) ELISA Kit  人膠原吡啶交聯   48T
SPA(Human Staphylococal protein A) ELISA Kit  人葡萄球菌蛋白A   48T
ConA(Human concanavalin A) ELISA Kit  人刀豆素A   48T
FEP(Human Free erythrocyte proloporphyrin) ELISA Kit  人游離原卟啉   48T
LBP(Human lipolysaccharide binding protein) ELISA Kit  人脂多糖結合蛋白   48T
GSH-Px(Human Glutathione peroxidase) ELISA Kit  人*過氧化酶   48T
GSH(Human glutathione) ELISA Kit  人*   48T
17-KS(Human 17-ketosteroids) ELISA Kit  人17-酮類固醇   48T
17-OHCS(Human 17-Hydroxycorticosteroids) ELISA Kit  人17羥皮質類固醇   48T
cath-K(Human Cathepsin K) ELISA Kit  人組織蛋白酶K   48T
BMPs(Human bone morphogenetic proteins) ELISA Kit  人骨形成蛋白   48T
RBP-4(Human Retinol binding protein 4) ELISA Kit  人*結合蛋白4   48T