細胞名稱：NCTC 1469（小鼠正常肝細胞）實驗方法

細胞形態

圓形

背景描述

NCTC 1469細胞是于1952年建系，源于正常C3H/An小鼠的肝臟組織；NCTC 1469細胞可表達H-2K抗原，鼠痘病毒陰性。

生長培養基

DMEM高糖(貨號:PM150210)＋10% HS(貨號:164215-100)＋1% P/S(貨號:PB180120)

培養條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

優勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
2、*，專業的細胞培養技術指導
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4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態圖片，五天內有問題公司負責重發，超過五天時限至一個月內重發細胞收半價，超過一個月重發全額收費。
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6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
鈣/鈣調素依賴蛋白激酶1β/CaMKIβ抗體 PNCK
丙酮酸激酶-M2抗體 PKM2
原鈣粘蛋白β7抗體 PCDHB7
*型纖溶酶原激活因子受體抗體 uPA Receptor
配對盒基因5抗體 PAX5
PEG3蛋白抗體 PEG3
泛素連接酶抗體 PIRH2
帕金蛋白抗體 Parkin
程序性死亡1抗體 PD-1
過氧化還原酶3抗體 PRDX3
前列腺酸性磷酸酶抗體 PSAP
蛋白激酶AKT底物1抗體 PRAS40
p21激活激酶1抗體 PAK1
庚型肝炎病毒多聚蛋白抗體 HGV Polyprotein
內脂素/內臟脂肪素/前B細胞克隆增強因子1抗體 PBEF1
胰島素原抗體 Proinsulin
平足蛋白gp36/淋巴管內皮細胞蛋白抗體 Podoplanin Protein
核苷酸內焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗體 ENPP1
胰腺特異轉錄因子PTF1A抗體 PTF1A
蛋白*磷酸酶PTPσ抗體 PTPRS
ETS結構域轉錄因子FEV抗體 Pet1
神經叢蛋白A3抗體 Plexin A3
磷酸化蛋白*磷酸酶1C抗體 phospho-PTPN6(Tyr564)
*/*蛋白磷酸酶4C抗體 PPP4C
神經元PAS結構域蛋白5抗體 PASD5
蛋白*磷酸酶受體PCPTP1抗體 PCPTP1
植烷酰*羥化酶2相互作用蛋白抗體 PHYHIP
旁瘤抗原MA1抗體 PNMA1
大腦蛋白1抗體 POU3F3
核糖核酸結合蛋白2抗體 PTBP2
磷酸化過氧化酶活化增生受體γ抗體 PPARγ Phospho-PPAR Gamma (ser273)
早老素蛋白1+2抗體 Presenilin 1 + 2
豬藍耳病病毒抗體 PRRSV
DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5)  腫瘤細胞調亡素/死亡受體5抗原 石英96孔板  0.5mg
DP-I/DSP(desmoplakin I )  橋粒斑蛋白1抗原  10毫升玻璃勻漿器  0.5mg
DVL1 (dishevelled 1)  蓬亂蛋白1 20毫升玻璃勻漿器  0.5mg
Dynamin 2(Ai-Human Dynamin-2 )  鳥苷三磷酸酶－發動蛋白2抗體 50毫升玻璃勻漿器  0.5mg
Nadrin peptide  發育調節蛋白多肽抗原 多聚賴氨酸載玻片  0.5mg
E2F1  轉錄因子E2F-1 明膠載玻片  0.5mg
E2F2  轉錄因子E2F-2抗原 Wescodyne實驗室消毒劑  0.5mg
E2F4  轉錄因子E2F-4抗原 PUREBRANE護手露  0.5mg
E2F6  轉錄因子E2F-6抗原 CLEAR & PURE潔手露  0.5mg
E2 tag  E2 tag多肽抗原 鞋底清潔劑  0.5mg
EAAT3(Excitatory amino acid transporters 3)  膠質細胞*運載蛋白3抗原 屏幕清潔劑（電視、電腦等）  0.5mg
EBNA-3 (EpsteinBarr nuclear Ai-gens 3)  EB病毒編碼核蛋白-3(抗原) 玻璃清潔劑（櫥窗、大門、汽車玻璃等）  0.5mg
ECE1(Endothelin Converting Enzyme 1)  內皮素轉化酶1抗原 空調清潔劑  0.5mg
ECE2(Endothelin Converting Enzyme 2)  內皮素轉化酶2抗原 臺桌清潔劑（飯桌、工作臺、學生課桌椅等）  0.5mg
ECP(eosinophil cationic protein)mouse rat  嗜酸性粒細胞陽離子蛋白抗原 鳥苷酸酶總活性比色法定量檢測試劑盒    0.5mg
ED-1 (Ectodermal Dysplasia 1)  外胚層發育不良抗原 Arf1鳥苷酸酶活性分析試劑盒  0.5mg
rhEGF(rh-Epidermal growth factor)  * Arf6鳥苷酸酶活性分析試劑盒  100ug
EGF(Epidermal growth factor)rat  重組表皮生長因子抗原(大鼠) Cdc42鳥苷酸酶活性分析試劑盒  0.5mg