細胞名稱:LLC-MK2（恒河猴腎細胞）實驗方法

細胞形態

上皮細胞樣

背景描述

LLC-MK2細胞源自6只成年綠猴的腎細胞懸液。據報道，LLC-MK2細胞對很多病毒敏感，包括腸道病毒、鼻病毒、粘病毒和痘病毒家族中的成員。

生長培養基

MEM(貨號:PM150410)＋10% FBS(貨號:164210-500)＋1% P/S(貨號:PB180120)

培養條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

優勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
2、*，專業的細胞培養技術指導
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6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
sulphate protoglycans 1
叉頭蛋白J1抗體 HFH-4
艾滋病病毒抗體 HIV p55+NP7
艾滋病病毒抗體 HIV p55+P6-Gag
艾滋病病毒抗體 HIV1 p55+p17
結合珠蛋白相關蛋白抗體 HPR
L-*脫羧酶抗體 HDC
乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白 HBXIP
組蛋白H2B.s抗體 Histone H2B.s
組蛋白去乙酰化酶4+5+9抗體 HDAC4 + 5 + 9
熱休克蛋白27相關蛋白1抗體 HSPBAP1
卟膽原脫氨酶抗體 HMBS
異質核糖核蛋白U2樣蛋白抗體 HORMAD2
肝癌衍生生長因子2抗體 HRP2
肝癌相關抗原57抗體 HCA57
補體C3抗體 Complement C3
甲型流感病毒血凝素抗體 H1N1 Hemagglutinin 2
甲狀旁腺功能亢進蛋白2/細胞分裂周期73抗體 HRPT2
線粒體*蛋白酶抗體 HTRA2
鉀/鈉超極化激活環核苷酸門控通道蛋白2抗體 HCN2
熱休克蛋白β7抗體 HSPβ7
鉀/鈉超極化激活環核苷酸門控通道蛋白3抗體 HCN3
鐵調節蛋白25抗體 Hepcidin-25
HD域內含蛋白2抗體 HDDC2
艾滋病病毒p55抗體 HIV1 p55 + p17
造血細胞激酶抗體 Hck
HEAT重復內含蛋白5B蛋白抗體 HEATR5B
缺氧誘導基因1B蛋白抗體 HIGD1B
乙酰化組蛋白H4抗體 Acetyl-Histone H4(K5)
熱休克蛋白B2抗體 HSPB2
人類白細胞抗原B27 HLA B27
螺旋環螺旋轉錄因子HATH6抗體 Protein atonal homolog 8
神經調節蛋白1β2抗體 HRG1
HDHD3蛋白抗體 HDHD3
子–β受體1抗體IgG 正常女性人體肝組織S9組分（5毫克/毫升）  0.2ml
Ai-TGF- BetaR 2/FITC  熒光素標記轉移生長因子–β受體2抗體IgG 吸煙者人體肺組織S9組分（5毫克/毫升）  0.2ml
Ai-TGF- BetaR 3/FITC  熒光素標記轉移生長因子–β受體3抗體IgG 非吸煙者人體肺組織S9組分（5毫克/毫升）  0.2ml
Ai-TGM3/FITC  熒光素標記轉谷氨酰酶3抗體IgG 正常人體腸組織S9組分（5毫克/毫升）  0.2ml
Ai-Thioredoxin 1/FITC  熒光素標記硫氧還蛋白抗體IgG 正常人體腎組織S9組分（5毫克/毫升）  0.2ml
Ai-Thymosin Alpha-1/FITC  熒光素標記* α-1抗體IgG 正常男性人體肝組織微粒體組分（5毫克/毫升）  0.2ml
Ai-Tie1/FITC  熒光素標記血管生成素-1受體抗體IgG 正常女性人體肝組織微粒體組分（5毫克/毫升）  0.2ml
Ai-Tie2/FITC  熒光素標記上皮生長因子樣域*激酶2IgG 吸煙者人體肺組織微粒體組分（5毫克/毫升）  0.2ml
Ai-Phospho-Tie2 (Tyr992) /FITC  熒光素標記磷酸化血管生成素受體2抗體IgG 非吸煙者人體肺組織微粒體組分（5毫克/毫升）  0.2ml
Ai-Phospho-Tie2 (Ser1119) /FITC  熒光素標記磷酸化血管生成素受體2抗體IgG 正常人體腸組織微粒體組分（5毫克/毫升）  0.2ml
Ai-TIEG1/KLF10/FITC  熒光素標記TGF-β誘導早期應答基因1抗體IgG 正常人體腎組織微粒體組分（5毫克/毫升）  0.2ml
Ai-RALDH2/FITC  熒光素標記*脫氫酶2型抗體IgG 正常大鼠（Sprague Dawley）肝組織微粒體組分（5 毫克/毫升）  0.2ml
ai-RARRES1/TIG1/FITC  熒光素標記*受體應答蛋白1抗體IgG 正常大鼠（Sprague Dawley）肺組織微粒體組分（5毫克/毫升）  0.2ml
Ai-TIGAR humen/FITC  熒光素標記兔抗人TIGAR蛋白抗體IgG 正常大鼠（Sprague Dawley）腸組織微粒體