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技術(shù)文章

豬DC細(xì)胞(DC)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

閱讀:272發(fā)布時間:2015-8-10

豬DC細(xì)胞(DC)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
使用目的:
本試劑盒用于測定豬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中 DC細(xì)胞(DC)含量。
豬DC細(xì)胞(DC)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中豬 DC 細(xì)胞(DC)
(DC)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入  DC 細(xì)胞(DC),
再與 HRP標(biāo)記的  DC 細(xì)胞(DC)抗體    ,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗
。用純化的豬 DC  細(xì)胞
滌后加底物 TMB顯色。TMB在   HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終
的黃色。顏色的深淺和樣品中的 DC細(xì)胞(DC)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在  450nm波長下測定
吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中豬  DC細(xì)胞(DC)濃度。
操作步驟
150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入  150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
150μl的  5號標(biāo)準(zhǔn)品加入  150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
150μl的  4號標(biāo)準(zhǔn)品加入  150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
150μl的  3號標(biāo)準(zhǔn)品加入  150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
150μl的  2號標(biāo)準(zhǔn)品加入  150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.  加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、
待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl(樣品zui終稀釋度為 5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
豬DC細(xì)胞(DC)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書注意事項

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未
用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有
析出,稀釋時可在浴中加溫助溶,洗滌時不影響
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在 5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本  OD值
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計
算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉
6.底物請避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
豬DC細(xì)胞(DC)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月


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