豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒 guinea pig Leukotriene B4,LT-B4 ELISA Kit ，規(guī)格：96T/48T，產(chǎn)品別名： 豚鼠白三烯B4(LTB4)檢測(cè)試劑盒
豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒原理的簡(jiǎn)要說(shuō)明書(shū)：LTB4 ( Leukotriene B4)，LTB4是5 -脂氧酶(5 – lipox – ygenase )代謝途徑的產(chǎn)物之一,中性粒細(xì)胞是其主要來(lái)源。LTB4通過(guò)Gq偶聯(lián)，刺激中性粒細(xì)胞分泌。LTB4在炎癥、免疫系統(tǒng)疾病和變態(tài)反應(yīng)中發(fā)揮著重要作用。LTB4是PPARα的配體,PPARα的激活可導(dǎo)致白三烯B4分解,限制炎癥反應(yīng)。
豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟
使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
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