人一氧化氮（NO）酶聯(lián)試劑盒說明書 免疫分析
試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍： 96T
6μmol/L -200μmol/L
使用目的：
本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中一氧化氮（NO）含量。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人一氧化氮（NO）水平。用純化的人一氧化氮（NO）
抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入一氧化氮（NO），再與HRP
標記的一氧化氮（NO）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物
TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏
色的深淺和樣品中的一氧化氮（NO）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD
值），通過標準曲線計算樣品中人一氧化氮（NO）濃度。
試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶
2 酶標試劑 6ml×1 瓶 8 標準品（400μmol/L） 0.5ml×1 瓶
3 酶標包被板 12 孔×8 條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張
6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個
標本要求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。
200μmol/L 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液
100μmol/L 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
50μmol/L 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
25μmol/L 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
12.5μmol/L 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，
然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡
量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒后棄去，如此
重復(fù)5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止
液后15 分鐘以內(nèi)進行。
操作程序總結(jié)：
計算 人一氧化氮（NO）酶聯(lián)試劑盒說明書
以標準物的濃度為橫坐標，OD 值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的
OD 值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD 值計算出標
準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD 值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，
即為樣品的實際濃度。
注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未
用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD 值
大于標準品孔*孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定，計
算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。
保存條件及有效期
纖維素fitc流式ZNF286IHC、FACS、WB、E
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 個月 人一氧化氮（NO）酶聯(lián)試劑盒說明書
2-甲氧乙基酯fitc流式ZNF537IHC、FACS、WB、ELISARabbit polyclonal to ZNF537 antibody
乙二胺fitc流式ZNF5IHC、FACS、WB、ELISARabbit polyclonal to ZNF500 antibody
乙二胺三乙酸三鈉鹽fitc流式ZNF499IHC、FACS、WB、ELISARabbit polyclonal to ZNF499 antibody
乙烯酯fitc流式ZNF426IHC、FACS、WB、ELISARabbit polyclonal to ZNF426 antibody
乙酯fitc流式ZNF365IHC、FACS、WB、ELISARabbit polyclonal to ZNF365 antibody
乙酯fitc流式ZNF36IHC、FACS、WB、ELISARabbit polyclonal to ZNF306 antibody
丁酯fitc流式ZNF358IHC、FACS、WB、ELISARabbit polyclonal to ZNF358 antibody
正丁酯fitc流式ZNF341IHC、FACS、WB、ELISARabbit polyclonal to ZNF341 antibody
丙烯酯fitc流式ZNF341IHC、FACS、WB、ELISARabbit polyclonal to ZNF341 antibody
甲酯fitc流式ZNF336IHC、FACS、WB、ELISARabbit polyclonal to ZNF336 antibody
甲酯fitc流式ZNF33IHC、FACS、WB、ELISAChicken polyclonal to ZNF330 antibody
甲醛fitc流式ZNF323IHC、FACS、WB、ELISARabbit polyclonal to ZNF323 antibody
異丙酯fitc流式ZNF318IHC、FACS、WB、ELISARabbit polyclonal to ZNF318 antibody
