1、將已經電泳確定的可回收的酶切產物在合適濃度的回收用瓊脂糖凝膠進行電泳。換用新的電泳緩沖液10×TAE(10×Tris-乙酸)。
　　
　　2、當溴酚藍遷移至足夠距離時(至少2cm以上)，在長波紫外燈下觀察，用清洗過的刀片在目的片段前切下與目的片段同長，寬度適當(一般2cm左右)的膠塊。
　　
　　注意：
　　
　　①不要忘記在膠下墊一個新的塑料手套防止污染。
　　
　　②小心不要將回收膠切裂，同時注意與目的帶相鄰的切面要盡量平整。
　　
　　3、將切好的回收膠塊放在回收膠槽內，在切去膠塊處加入低熔點瓊脂糖膠，待其凝固后將其小心放回電泳槽繼續進行電泳。小心低熔點瓊脂糖凝膠塊與原回收膠塊的交界面易斷裂。
　　
　　4、待目的帶*進入低熔點瓊脂糖膠后，在長波紫外燈下用清洗過的刀片切下含有所需DNA帶的凝膠條，置于新的滅菌的1.5mLeppendorf管中，加300µLTE。
　　
　　5、65℃水浴10min或更長使膠塊*融化。
　　
　　6、立即加入等體積(300~350µL)Tris-Cl飽和酚(pH8.0)，搖晃混勻。
　　
　　7、12000rpm離心5min。
　　
　　8、小心將水相移到另一1.5mLEppendorf管中，加入2.5~3倍體積(780µL即可)預冷無水乙醇。注意不要吸入下層雜質及酚相，沒把握時寧可放棄一些上層水相。
　　
　　9、12000rpm離心5min。
　　
　　10、小心將水相移到另一1.5mLEppendorf管中，加入2.5~3倍體積(780µL即可)預冷無水乙醇。注意不要吸入下層雜質及酚相，沒把握時寧可放棄一些上層水相
　　
　　11、置液氮3min，取出后可置于-20℃放幾min。小心防止管子爆裂。
　　
　　12、12000rpm離心10min。
　　
　　13、迅速棄上清，一般在管底會有針尖大小的沉淀物，小心用無水乙醇清洗后置于恒溫器上干燥(55℃)5~10min至無乙醇氣味，再加入20µLddH2O溶解。
　　
　　14、取20µL電泳定量后-20℃儲存備用。