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當(dāng)前位置:上海士鋒生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>有絲分裂實(shí)驗(yàn)
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br />學(xué)習(xí)植物根尖壓片方法的基本技術(shù)。熟悉細(xì)胞有絲分裂各個(gè)時(shí)期的形態(tài)特征及染色體的變化,并學(xué)會(huì)染色體簡(jiǎn)易*片的制片技術(shù)。
二、實(shí)驗(yàn)原理
有絲分裂是體細(xì)胞分裂的主要方式,一般發(fā)生在植物根尖或莖尖的分生組織中。在有絲分裂時(shí),細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)有很大的變化,但以細(xì)胞核內(nèi)染色體的變化zui為明顯,而且是有規(guī)律地進(jìn)行。各種生物染色體在數(shù)目上和形態(tài)上是相對(duì)恒定的,并隨科屬種的不同而具有一定的特征。洋蔥體細(xì)胞中有8對(duì)共16條染色體,在有絲分裂過(guò)程中,每個(gè)染色體能復(fù)制一份,然后分配到兩個(gè)子細(xì)胞中,所以?xún)蓚€(gè)子細(xì)胞與母細(xì)胞所含的染色體在數(shù)目、形態(tài)和性質(zhì)上都是相同的。在細(xì)胞遺傳學(xué)研究中,人們常常需要了解某一物種的染色體數(shù)目,而zui有效的方法就是觀察細(xì)胞有絲分裂的中期,這樣能得到較為準(zhǔn)確的結(jié)果。
三、實(shí)驗(yàn)材料
洋蔥(Aillum cepa)根尖
蠶豆(Vicia faba)根尖
四、實(shí)驗(yàn)器具和藥品試劑
顯微鏡、培養(yǎng)箱、恒溫水浴鍋、溫度計(jì)、鑷子、解剖針、刀片、載玻片、蓋玻片、燒杯、量筒、滴瓶、切片架、切片盒、凹面玻片、青霉素瓶、大培養(yǎng)皿、紗布、吸水紙、鉛筆、吸管。
卡諾氏固定液(甲醇或95%乙醇3份,冰醋酸1份)、改良苯酚品紅染色液(見(jiàn)附錄:實(shí)驗(yàn)試劑的配制)、0.002M8-羥基喹啉水溶液、0.05—0.2%秋水仙素溶液、對(duì)二氯苯飽和水溶液、1N HCl、95%乙醇、正丁醇、加拿大樹(shù)膠。
五、實(shí)驗(yàn)方法和步驟
(一)材料準(zhǔn)備 選取蠶豆(或小麥、玉米等)種子放在燒杯中,放清水浸泡過(guò)夜,使種子吸水脹大后倒出,再用清水洗幾次,用多層紗布包好種子,放進(jìn)20~25℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。當(dāng)根尖長(zhǎng)1~3cm 時(shí),即可以進(jìn)行預(yù)處理。
(二)預(yù)處理 為了有利于對(duì)有絲分裂中染色體的觀察和計(jì)數(shù),在固定之前應(yīng)用理化因素進(jìn)行預(yù)處理,這樣可以改變細(xì)胞質(zhì)的粘度,抑制或破壞紡錘絲的形成,促使染色體縮短和分散等。一般是在分裂高峰前處理1.5小時(shí)以上。處理的方法如下:
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