植物原生質體融合和培養在理論和實踐上都有很大的意義，在植物遺傳工程和育種研究上具有廣闊的應用前景。它是植物同源、異源多倍體獲得的途徑之一，它不僅能克服遠緣雜交有性不親和障礙，也可克眼傳統的通過有性雜交誘導多倍體植株的麻煩，zui終將野生種的遠緣基因導入栽培種中，原生質體融合技術可望成為作物改良的有力工具之一。
植物原生質體培養方法起源于植物單細胞的培養方法。1954年，植物單細胞培養才獲得成功。Mllir 培養的萬壽菊及煙草懸浮細胞植入到長有愈傷組織的培養基上得到了它們的單細胞克隆，并建立了看護培養的方法；1960年Jones等建立了微室培養法。同年，Cocking應用酶法分離原生質獲得成功，從而在實驗條件下很容易獲得大量的原生質體。隨著多種適用于原生質體分離的商品酶的出現，原生質體的培養方法也得到了不斷地改進，現在常用的原生質體培養方法有：液體淺層培養法、雙層培養法、瓊脂糖包埋法、瓊脂島培養法以及使用條件培養基或飼喂培養等。

實驗目的：

了解植物原生質體分離、融合和培養的基本原理及其過程

實驗原理：

植物原生質體是除去細胞壁后為原生質所包圍的“裸露細胞”，是開展基礎研究的理想材料。其中酶解法分離原生質體是一個常用的技術，其原理是植物細胞壁主要由纖維素、半纖維素和果膠質組成，因而使用纖維素酶、半纖維素酶和果膠酶能降解細胞壁成分，除去細胞壁。

許多化學、物理學和生物學方法可誘導原主質體融合，現在被廣泛采用并證明行之有效的融合方法是聚乙二醇(PEG)法。高Ca高pH法和電融合法：

PEG作為一種高分子化合物，20～50％的濃度能對原生質體產生瞬間沖擊效應，原生質體很快發生收縮與粘連，隨后用高Ca高pH法進行清洗．使原生質體融合得以完成。

PEG誘導融合的機理：PEG由于含有醚鍵而具負極性，與水、蛋白質和碳水化合物等一些正極化基團能形成氫鍵，當PEG分子足夠長時，可阼為鄰近原生質表面之間的分子橋而使之粘連。PEG也能連接Ca2+等陽離子，Ca2+可在一些負極化基團和PEG之間形成橋，因而促進粘連。在洗滌過程中，連接在原生質體膜上的PEG分子可被洗脫．這樣將引起電荷的紊亂和再分布．從而引起原生質體融合：高Ca高pH由于增加了質膜的流動性，因而也大大提高了融合頻率，洗滌時的滲透壓沖擊對融合也可能起作用。