酶組織化學(xué)的基本原理

    酶組織化學(xué) 是顯示酶的活性，即顯示酶的催化作用，而不是酶本身，酶本身并不發(fā)生反應(yīng)。在一定pH和適宜溫度條件下，組織或細(xì)胞中的酶與孵育液中的特異性酶作用底物反應(yīng)．催化底物形成無色初級反應(yīng)產(chǎn)物，后者再與某種捕捉劑結(jié)合，形成有色的終產(chǎn)物沉淀于酶所在部位，使組織切片中的酶變成顯微鏡下的可見物。倘若此反應(yīng)產(chǎn)物仍然無色，則需再經(jīng)置換劑處理，使五色的反應(yīng)產(chǎn)物沉淀被置換為有色的zui終反應(yīng)產(chǎn)物。組織細(xì)胞內(nèi)的各種酶僅有少數(shù)酶能用于組織化學(xué)染色，大部分要通過上述基本原理間接證明酶 的存在。

    1．初級反應(yīng)產(chǎn)物(initial reaction product，IRP)  是指底物被酶直接分解產(chǎn)生的物質(zhì)。理想的初級反應(yīng)產(chǎn)物應(yīng)是既不溶于水，也不溶于脂類的，以免發(fā)生擴(kuò)散。

    2．zui終反應(yīng)產(chǎn)物(final reaction product，F(xiàn)RP)  是指不溶性初級反應(yīng)產(chǎn)物可經(jīng)偶聯(lián)和捕捉反應(yīng)而呈色。

    3．偶聯(lián)和捕捉(coupling and capture)  是指生物合成中，在同一時(shí)間內(nèi)進(jìn)行兩種在性質(zhì)上*相反的化學(xué)反應(yīng)，如一個(gè)放能反應(yīng)和一個(gè)吸能反應(yīng)同時(shí)進(jìn)行，即為偶聯(lián)。放出的能量，常不是直接被利用，而是先被某些化合物捕獲(吸能)。機(jī)體內(nèi)zui為重要的偶聯(lián)反應(yīng)和捕捉活動是氧化磷酸化。

    酶具有只作用于該酶底物的性質(zhì)，稱為底物特異性(substrate specificity)。但是，偶爾也有一種底物可以被兩種或兩種以上酶分解的情況，這樣，在底物混合液中孵育組織切片時(shí)，一個(gè)底物可能同時(shí)發(fā)生幾種酶反應(yīng)，為獲得特異酶反應(yīng)，必須使用酶抑制劑或酶激活劑進(jìn)行鑒別。