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上海紀(jì)寧實(shí)業(yè)有限公司
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閱讀:777發(fā)布時(shí)間:2014-2-28
常用人血清試劑和培養(yǎng)基的配制
(一) 反應(yīng)劑 1、檢查葡萄糖試劑 配方一 本尼迪克(Benedict)溶液 (1) 在400毫升蒸餾水中溶解85克檸檬酸鈉和50克*。 (2) 在50毫升加熱的蒸餾水中溶解8.5克硫酸銅。 把硫酸銅溶液緩緩倒入檸檬酸鈉-碳酸鈉溶液中,邊加邊攪拌,如果產(chǎn)生沉淀,要過濾。本尼迪克溶液配制后能長期使用(存放時(shí)間較久而產(chǎn)生沉淀是,取上層清液使用,不必重新配制)。 本尼迪克溶液用來測試食物、血液和尿中的葡萄糖,可測出0.15 ~0.20%的葡萄糖。這種溶液跟未知物同加熱時(shí),如果未知物中有葡萄糖,會(huì)形成紅色的氧化亞銅沉淀物。 配方二 裴林(Fehling)溶液 (1)把34.5克硫酸銅溶于500毫升蒸餾水中。 (2)把125克氫氧化鉀(鈉)和173克酒石酸鉀鈉溶解在500毫升蒸餾水中。 上述兩種溶液應(yīng)分別保存。在檢測葡萄糖時(shí),使他們等量的混合,加入待測物的試管內(nèi),加熱到沸騰。如果有葡萄糖,會(huì)形成紅色的氧化亞銅沉淀物。 2、檢查淀粉的試劑 魯哥氏(Lugol’s)溶液(碘液) 取6克*溶于20毫升蒸餾水中,攪拌到溶解后,加入4克碘,等碘充分溶解,在加入80毫升蒸餾水,
貯存在棕色試劑瓶內(nèi)。 碘液用來測試食物樣品或葉片中的淀粉,也用作染色劑,例如可染色鞭毛、纖毛和細(xì)胞核等。 3、檢查蛋白質(zhì)的試劑 配方一 米倫(Millon)試劑 在60毫升濃硝酸(比重1.42)中溶解40克汞(水浴加溫可助溶),溶解后加入兩倍體積的蒸餾水稀釋,靜置澄清后,取它上層的清液備用。這種試劑可長期保存。 在待測物中加入少量米倫試劑,加熱,如果有蛋白質(zhì),會(huì)出現(xiàn)紅色。這種試劑不能用來測定尿中的蛋白質(zhì)。 配方二 雙縮尿試劑 分別配制10%氫氧化鈉溶液和1%硫酸銅溶液。 在3毫升待測物中加入1毫升10%氫氧化鈉溶液和1滴1%硫酸銅溶液。如果有蛋白質(zhì),會(huì)出現(xiàn)紫色反應(yīng)。 4、檢查脂肪的試劑 蘇丹Ⅲ(Ⅳ)酒精飽和溶液 取0.2克蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ),放入純酒精中,加熱,使它充分溶解,成為飽和酒精溶液,過濾后密閉在試劑瓶內(nèi)保存?zhèn)溆谩? 5、酸堿指示劑 配方一 *試劑和試紙 *試劑 取1克*,溶解在100毫升60%的酒精溶液里,裝在試劑瓶內(nèi)密閉保存。 酚態(tài)試紙 取1克*,溶解在100毫升95%酒精溶液里,加入00毫升蒸餾水。把綠紙條放入*溶液中浸濕后,取出,放在無氨氣影響處晾干。 酚泰試劑(試紙) pH值變色范圍8.2~10,在酸性和中性溶液中都無色,再堿性溶液中呈深紅色。 配方二 紅藍(lán)石蕊試紙 取市售石蕊1克,放在80毫升10%酒精溶液中攪拌,使它溶解,然后過濾。把濾液分成兩份。1份滴入稀磷酸或稀硫酸,到出現(xiàn)紅色為止。另1份滴入稀氫氧化鈉溶液,到出現(xiàn)藍(lán)色為止。在上述制備的溶液中分別浸濕濾紙條,隨后取出濾紙條,放在蔽光處、無酸堿性氣體影響的地方晾干,即的紅、藍(lán)兩種石蕊試紙。 紅石蕊試紙?jiān)趬A性溶液中變藍(lán),藍(lán)石蕊試紙?jiān)谒嵝匀芤褐凶兗t。 6、檢查二氧化碳的試劑 檢查二氧化碳的試劑,可用溴代*藍(lán)溶液和石灰水。 配方一 溴代*藍(lán)溶液 取0.1克溴代*藍(lán),溶解在100毫升蒸餾水里,滴入少量0.1%氫氧化鉀溶液,使它成為弱堿性溶液而呈藍(lán)色。 溴代*藍(lán)溶液pH值變色范圍是6.0(黃)~7.6(藍(lán))。待測物中如果有二氧化碳,會(huì)形成碳酸而使溶液變成黃色。 配方二 石灰水 在蒸餾水中加入生石灰(氧化鈣),變加邊攪拌,直到加入的生石灰不再溶解,呈飽和狀態(tài)時(shí)為止。在石灰水澄清后,傾出上層清液,用濾紙過濾,放在密閉瓶內(nèi)保存。 如果測定的物質(zhì)中有二氧化碳,會(huì)生成碳酸鈣,使石灰水變渾濁。 7、檢查細(xì)胞生活力的試劑 檢查細(xì)胞有無生活力,可用中性紅甲基藍(lán)試劑。人血清配制的方法是先分別配制1%中性紅溶液和1%甲基藍(lán)溶液,這兩種溶液各取1份混合,用來鑒定細(xì)胞的死活。該試劑使活細(xì)胞的液泡染上紅色,而使死細(xì)胞全部染成藍(lán)色。 (二)分離液 1、肌細(xì)胞分離液
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