人H1N1神經氨酸酶抑制劑(NAIs)Elisa試劑盒操作步驟
1.
標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。
240pg/ml
5 號標準品
150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液
120pg/ml
4 號標準品
150µl 的 5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
60pg/ml
3 號標準品
150µl 的 4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
30pg/ml
2 號標準品
150µl 的 3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
15pg/ml
1 號標準品
150µl 的 2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
2.
加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl，
然后再加待測樣品 10µl（樣品zui終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡
量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.
溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.
配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此
重復 5 次，拍干。
6.
加酶：每孔加入酶標試劑 50µl，空白孔除外。
7.
溫育：操作同 3。
8.
洗滌：操作同 5。
9.
顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液 50µl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應在加終止
液后 15 分鐘以內進行。
人H1N1神經氨酸酶抑制劑(NAIs)Elisa試劑盒實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人 H1N1 神經氨酸酶抑制劑 (NAIs)水平。用純
化的人 H1N1 神經氨酸酶抑制劑 (NAIs)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微
孔中依次加入 H1N1 神經氨酸酶抑制劑 (NAIs)，再與 HRP 標記的 H1N1 神經氨酸酶抑制劑
(NAIs)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB
在 HRP 酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中
的 H1N1 神經氨酸酶抑制劑 (NAIs)呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD
值），通過標準曲線計算樣品中人 H1N1 神經氨酸酶抑制劑 (NAIs)濃度。
：021 60340850 021 60340830 021 60340820
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