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華瑞科研網-ELISA試劑盒
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閱讀:101發布時間:2014-11-28
華瑞科研網-ELISA試劑盒
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人白細胞介素-8(IL-8)Elisa試劑盒操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。
1200ng/L 5 號標準品 150µl的原倍標準品加入150µl標準品稀釋液
600 ng/L 4 號標準品 150µl的5 號標準品加入150µl標準品稀釋液
300 ng/L 3 號標準品 150µl的4 號標準品加入150µl標準品稀釋液
150 ng/L 2 號標準品 150µl的3 號標準品加入150µl標準品稀釋液
75 ng/L 1 號標準品 150µl的2 號標準品加入150µl標準品稀釋液
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同) 、標準孔、待測樣品孔。 在酶標包被板上標準品準確加樣50µl, 待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl,
然后再加待測樣品10µl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡
量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此
重復 5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50µl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50µl,再加入顯色劑B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色) 。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值) 。 測定應在加終止
液后 15分鐘以內進行。
人白細胞介素-8(IL-8)Elisa試劑盒保存條件及有效期
1.試劑盒保存: ;2-8℃。
2.有效期:6個月
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