小鼠白血病細胞G-CSF依賴性，NFS-60細胞 NFS-60 懸浮淋巴母細胞
（2）客戶自備試劑
1）PBS
2）RPMI-1640培養(yǎng)基（不含Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗
3）0.25% （W/V）*（含0.02% EDTA）
（3）細胞背景
1）生長方式：懸浮
2）種屬：Homo sapiens 小鼠
（4）小鼠白血病細胞G-CSF依賴性，NFS-60細胞培養(yǎng)條件
1）培養(yǎng)基：RPMI-1640培養(yǎng)基（不含Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗
2）溫度：37.0°C
3）氣體:空氣 95%，CO2 5%
（5）培養(yǎng)方法
收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況：
如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，留10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
如果細胞已長滿（達80-90%）。即可進行傳代，具體步驟如下：
1）棄去培養(yǎng)液，用PBS洗1-2次。
2）向瓶內加入1.0-2.0ml*液，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，吸取*，加含有6ml 含10%血清的培養(yǎng)液，輕輕吹打細胞。
3）加入等量的的培養(yǎng)液，輕輕吹打混勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)
4）傳代比例：1:2-1:3
（6）常見問題及解決方案
1）培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細胞*可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決。
2）細胞漂浮：培養(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以去掉，留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細胞生長至匯合度80%，進行消化傳代；如細胞還是不貼壁，將細胞離心收集轉到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術人員會一直跟蹤指導，直到問題解決。
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