人神經母細胞瘤細胞，SH-SY5Y細胞 SH-SY5Y 貼壁上皮細胞
（1）細胞背景
SH-SY5Y是1970年建自骨瘤轉移灶的神經母細胞瘤SK-N-SH細胞系經三次克隆后的亞系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。 該細胞顯示中等水平的多巴胺-β-羥基酶活性。 SH-SY5Y細胞的飽和密度大于1X106細胞/cm2。
（2）客戶自備試劑
1）PBS
2）RPMI-1640培養基（不含Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗
3）0.25% （W/V）*（含0.02% EDTA）
（3）細胞背景
1）生長方式：貼壁
2）種屬：Homo sapiens 人
（4）培養條件
1）培養基：RPMI-1640培養基（不含Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗
2）溫度：37.0°C
3）氣體:空氣 95%，CO2 5%
（5）人神經母細胞瘤細胞，SH-SY5Y細胞培養方法
收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況：
如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶，留10ml培養液繼續培養。
如果細胞已長滿（達80-90%）。即可進行傳代，具體步驟如下：
1）棄去培養液，用PBS洗1-2次。
2）向瓶內加入1.0-2.0ml*液，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，吸取*，加含有6ml 含10%血清的培養液，輕輕吹打細胞。
3）加入等量的的培養液，輕輕吹打混勻后吸出一半，分到新的培養
4）傳代比例：1:2-1:3
（6）常見問題及解決方案
1）培養瓶有破裂，培養液有漏液：細胞*可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決。
2）細胞漂浮：培養瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養箱。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以去掉，留10ml培養液培養觀察，細胞生長至匯合度80%，進行消化傳代；如細胞還是不貼壁，將細胞離心收集轉到新培養瓶，原培養瓶加部分培養液繼續培養，中間注意觀察，我們的技術人員會一直跟蹤指導，直到問題解決。
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FITC標記二抗（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X76999 100微升
蛋白質A標記二抗（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77000 100微升
HRP標記二抗（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77001 100微升
AP標記二抗（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77002 100微升
TRITC標記二抗（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77003 100微升
Cy2標記二抗（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77004 100微升
Cy3標記二抗（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77005 100微升
Cy5標記二抗（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77006 100微升
EGFP標記二抗（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77007 100微升
GST（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77008 100微升
HA（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77009 100微升
FLAG（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77010 100微升
P53（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77011 100微升
HIS（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77012 100微升
ACTIN（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77013 100微升
GPDGP（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77014 100微升
APC（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77015 100微克
CDK2（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77016 100微克
CDK3（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77017 100微克
CDK4（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77018 100微克
CDK6（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77019 100微克
P16（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77020 100微克
P21（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77021 100微克
P27（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77022 100微克
P35（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77023 100微克
P35/P25（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77024 100微克
Annexin V（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77025 100微克
PAR-1（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77026 100微克
PAR-2（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77027 100微克
PAR-3（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77028 100微克
PARP（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77029 100微克
AKT（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77030 100微克
P38（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77031 100微克
PDGF-A（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77032 100微克
PDGF-B（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77033 100微克
VEGF（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77034 100微克
BAD（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77035 100微克
BAX（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） X77036 100微克
